Question

【题目】实验设计

关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下:

土壤取样:

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3左右,再取样,将样品装入事先准备好的________中。

（1）样品的稀释

稀释原因:样品的________直接影响平板上生长的________

稀释标准:选用一定稀释范围的样品液进行培养,保证获得菌落数在________之间,便于计数。

（2）稀释倍数

a.测定土壤中细菌的数量,一般选用________倍的稀释液进行平板培养;

b.测定放线菌的数量,一般选用________倍的稀释液进行平板培养;

c.测定真菌的数量,一般选用________倍的稀释液进行平板培养。

（3）微生物的培养与观察

培养:不同种类的微生物,往往需要不同的培养________和培养________

观察:每隔________统计一次________数目,最后选取菌落数目________时的记录作为结果。

（4）细菌的计数

当菌落数目稳定时,取同一________下的3个________进行计数,求出________,并根据所对应的________计算出样品中细菌的数目。

Answer 1

【答案】 信封 稀释程度 菌落数目 30-300 104、105和106 103、104、105 102、103、104 温度 时间 24h 菌落 稳定 稀释度 平板 菌落数的平均值 稀释度

【解析】试题分析：本题主要考查微生物的分离和计数等相关知识点，识记微生物的分离步骤，再结合题意准确回答本题。

土壤取样时，由于表层土壤相对干燥，小动物分布较少，所以土壤取样时，应先铲去表层土3～8cm左右，再取样，再将样品装入事先准备好的信封中。

(1)样品需要稀释，因为稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目，选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间，适于计数的平板。

(2) 在土壤中，细菌的数量比真菌更多，在测定土壤中不同种类的生物数量，所用的稀释倍数是不同的，为了确保稀释后能形成菌落数在30-300之间的培养皿，在进行土壤中微生物的分离与计数时，就需要按照不同的稀释度分别进行涂布，测定细菌一般选择104、105、106倍稀释，测定放线菌一般选择103、104、105倍稀释，测定真菌一般选择102、103、104倍稀释。

（3）不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间，用稀释涂布平板法统计活菌数目时，每隔24h统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目。

（4）当菌落数目稳定时,取同一个稀释度下3个平板进行计数,求出菌落数的平均值，并根据所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。