题目内容
【题目】PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，操作步骤简介如下：
第Ⅰ步：准备“汤”和模板DNA
A．配制多聚酶链式反应“汤”
配方：蒸馏水100SPU 缓冲液15SPU
氯化镁溶液8SPU 引物Ⅰ3SPU
引物Ⅱ3SPU DNA聚合酶1SPU
矿物油1SPU dNTP每一种各加4SPU
注：①SPU是一种溶液的计量单位；②矿物油可防止聚合酶在冻结时受伤害，以保证酶的活性；③dNTP有四种：dATP、dGTP、dCTP、dTTP。
B．准备要拷贝的DNA
如要拷贝自己的DNA，可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动。加热使蒸馏水沸腾，使细胞破碎释放出DNA。用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。
第Ⅱ步：多聚酶链式反应
①将DNA(B)放入汤(A)中。②水浴加热。首先，95℃，使DNA双螺旋打开，历时1min；然后，55℃，使引物结合到DNA上，历时30s；最后，72℃，与DNA聚合酶结合使DNA复制，历时1min。③重复步骤②。每重复一次，即完成一次拷贝。
根据上述操作过程回答下列问题：
(1)以上材料可以说明（____）
A．DNA的复制必须在活细胞中才能完成
B．DNA能指导蛋白质的合成
C．在合适的条件下，非细胞环境也能进行DNA的复制
D．PCR技术是一种无性生殖技术
(2)若用人体细胞内的遗传物质做PCR扩增，则扩增后的几百亿个DNA分子起码可分为46种。要将其分开，可用电泳、染色等技术，常用的试剂有溴化乙锭等。有些试剂毒性较强，因此应戴上化学实验专用手套作为保护措施，以免其与皮肤接触。溴化乙锭是一种强烈的诱变物，若接触皮肤活细胞，很可能会引起（____）
A．基因重组
B．该个体会产生变异较大的后代
C．癌变
D．皮肤外层是死细胞，该物质接触皮肤后对人体不会有影响
(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶，取自生长在热泉中的一种细菌。就PCR技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是___________________。
(4)PCR技术能将某一DNA分子扩增成许多相同的DNA片段，原因是：①DNA分子具有____________________结构；②DNA复制时遵循______________________________原则。
(5)DNA分子进行扩增时，除了所要扩增的DNA片段外，还需要四种________________、__________和__________等条件。若已知DNA的一条单链的碱基组成为ATCCGAT，则与它互补的另一条单链的碱基组成为__________________________________________________。
【答案】C C 耐高温，在较高的温度下不变性 规则的双螺旋 碱基互补配对 脱氧核苷酸 能量 酶 TAGGCTA
【解析】
PCR技术又叫聚合酶链式反应，是模拟体内DNA的天然复制过程，在体外扩增DNA分子的一种分子生物学技术，主要用于扩增位于两段已知序列之间的DNA区段。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2倍。
（1）以上材料是体外扩增技术PCR：
A．DNA的复制不必在活细胞中才能完成，可以体外扩增，错误；
B．本实验只进行了DNA复制，没有进行蛋白质的合成，错误；
C．在合适的条件下，非细胞环境也能进行DNA的复制，正确；
D．PCR技术是在体外扩增DNA分子的一种分子生物学技术，错误。
故选C。
（2）溴化乙锭是一种化学诱变物，在DNA的复制过程中，诱发基因突变，可能导致细胞发生癌变，故选C。
（3）PCR技术要在较高的温度下进行，所以使用的DNA聚合酶要耐高温，在较高的温度下不变性。
（4）DNA规则的双螺旋结构和碱基互补配对原则使DNA能够复制出与其完全相同的子代。
（5）DNA分子复制时，不仅需要DNA片段，还需要四种游离的脱氧核苷酸、能量、酶等条件。由碱基互补配对原则可知，其互补链的碱基组成为TAGGCTA。
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