题目内容

【题目】1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑____________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、____________等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。

2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行________(消毒、灭菌);操作者的双手需要进行清洗和______;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能__________

3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_______

4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________

5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________

6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

【答案】1)温度 酸碱度 易培养 生活周期短

2)灭菌 消毒 损伤DNA的结构

3)比例合适

4)鉴定(或分类)

5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生.

6)灭菌

【解析】

1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短

等优点,培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。

2)灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,所以对培养基和培养皿进行灭菌,消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物, 操作者的双手需要进行清洗和消毒, 紫外线能使蛋白质变性,还能损伤DNA的结构.

3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养,应保证样品稀释的比例适合.

4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定.

5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生.

6)因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素,并可能导致肠管出现严重症状,使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

练习册系列答案
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【题目】PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,操作步骤简介如下:

第Ⅰ步:准备“汤”和模板DNA

A.配制多聚酶链式反应“汤”

配方:蒸馏水100SPU  缓冲液15SPU  

氯化镁溶液8SPU  引物Ⅰ3SPU  

引物Ⅱ3SPU  DNA聚合酶1SPU  

矿物油1SPU  dNTP每一种各加4SPU  

注:①SPU是一种溶液的计量单位;②矿物油可防止聚合酶在冻结时受伤害,以保证酶的活性;③dNTP有四种:dATP、dGTP、dCTP、dTTP。

B.准备要拷贝的DNA

如要拷贝自己的DNA,可以用一牙签轻刮口腔内壁,将牙签放入蒸馏水中摇动。加热使蒸馏水沸腾,使细胞破碎释放出DNA。用离心机离心后,去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。

第Ⅱ步:多聚酶链式反应

①将DNA(B)放入汤(A)中。②水浴加热。首先,95℃,使DNA双螺旋打开,历时1min;然后,55℃,使引物结合到DNA上,历时30s;最后,72℃,与DNA聚合酶结合使DNA复制,历时1min。③重复步骤②。每重复一次,即完成一次拷贝。

根据上述操作过程回答下列问题:

(1)以上材料可以说明____

A.DNA的复制必须在活细胞中才能完成

B.DNA能指导蛋白质的合成

C.在合适的条件下,非细胞环境也能进行DNA的复制

D.PCR技术是一种无性生殖技术

(2)若用人体细胞内的遗传物质做PCR扩增,则扩增后的几百亿个DNA分子起码可分为46种。要将其分开,可用电泳、染色等技术,常用的试剂有溴化乙锭等。有些试剂毒性较强,因此应戴上化学实验专用手套作为保护措施,以免其与皮肤接触。溴化乙锭是一种强烈的诱变物,若接触皮肤活细胞,很可能会引起____

A.基因重组

B.该个体会产生变异较大的后代

C.癌变

D.皮肤外层是死细胞,该物质接触皮肤后对人体不会有影响

(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶,取自生长在热泉中的一种细菌。就PCR技术来讲,你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是___________________

(4)PCR技术能将某一DNA分子扩增成许多相同的DNA片段,原因是:①DNA分子具有____________________结构;②DNA复制时遵循______________________________原则。

(5)DNA分子进行扩增时,除了所要扩增的DNA片段外,还需要四种____________________________________等条件。若已知DNA的一条单链的碱基组成为ATCCGAT,则与它互补的另一条单链的碱基组成为__________________________________________________

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