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【题目】【生物——选修1:生物技术实践】

池塘水中的硝化细菌、蓝藻和大肠杆菌等,可利用选择培养基从池塘水筛选某种微生物。供选材料:葡萄糖、纤维素、牛肉膏、(NH42SO4、KNO3、无机盐、琼脂、伊红美蓝试剂、H2O等。

(1)已知硝化细菌可用过将铵盐氧化为硝酸盐来获取能量进行化能合成作用,则上述供选材料中的________可作为筛选并扩大培养硝化细菌的培养基成分。配制好的培养基常采用___________法灭菌。

(2)若需检测是否存在大肠杆菌,可在上述培养基成分的基础上另外添加________等物质,大肠杆菌菌落呈现___________。由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的_________就是菌落。

(3)若需对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数。可采用的接种方法是______。对纯化的菌种进行临时保藏,应采取的措施是________

【答案】 (NH42SO4、无机盐、H2O 高压蒸汽灭菌 葡萄糖、伊红美蓝试剂、琼脂 黑色 子细胞群体 稀释涂布平板 将纯化的菌种接种在固体斜面培养基上,置于4°C的环境中保存

【解析】试题分析:硝化细菌属于自养型生物中的化能自养型生物,利用的能量的是氨氧化分解时释放的化学能,因此在培养硝化细菌时,培养基中必须要有铵盐,也可以利用此方法与其它细菌分离;鉴别、培养大肠杆菌可使用伊红-美蓝培养基,菌落呈黑色或紫黑色有金属光泽。

(1)硝化细菌属于自养微生物,培养时培养基成分不需要有机碳,所以在筛选硝化细菌时,其培养基成份包括H2O、(NH42SO4、无机盐。微生物培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

(2)大肠杆菌是异养型微生物,筛选大肠杆菌菌落需要加入有机碳葡萄糖(牛肉膏)和伊红美蓝染液(指示剂),菌落特征为黑色有金属光泽。由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体就是菌落。

(3)微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,其中后者可以用于计数。将纯化的菌种接种在固体斜面培养基上,置于4°C的环境中保存。

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【题目】研究人员用四倍体马铃薯(4n=48)和抗青枯病的野生型二倍体马铃薯(2n=24)进行体细胞杂交,培育抗青枯病的马铃薯。

(1)研究人员用四倍体马铃薯的叶片拆究原生质体制备条件,结果如表所示:

组别

酶的种类

酶的浓度

原生质体产量

(×106个/g)

镜检结果

1

纤维素酶

1.0

0.4

未解离的细胞团多

果胶酶

0.5

2

纤维素酶

1.0

0.08

有许多碎片

果胶酶

1.0

3

纤维素酶

0.5

1.5

未完全解离

果胶酶

0.5

4

纤维素酶

0.5

3.4

解离较好,细胞破碎严重

果胶酶

1.0

5

纤维素酶

0.4

18.8

解离充分,碎片少

果胶酶

0.7

①据表分析,制备原生质体的最佳组合是第__________组,叶片解离程度主要取决于__________的浓度。

②制备的原生质体应置于浓度__________马铃薯叶片细胞液浓度的溶液中进行培养,以保持原生质体的正常形态。

(2)为了便于在显微镜下对杂种细胞进行镜检筛选,将用四倍体马铃薯叶片制备的原生质体与用野生型二倍体马铃薯的__________(填“叶片”或“幼根”)为材料制备的原生质体进行融合。把两种原生质体置于加入__________的溶液中促融。

(3)为进一步从染色体水平上检测杂种植株,科学家选取杂种植株根尖进行__________后用碱性染料染色并制片,显微镜下对__________期的细胞进行染色体计数。

(4)为达到育种目标,还需要对杂种植株进行__________抗性检测以筛选得到抗性马铃薯新种。

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