题目内容
【题目】HIV（艾滋病病毒）为逆转录病毒，而逆转录酶缺乏校正修复功能，因而HIV的变异频率非常高。因此，研制安全、有效的疫苗是控制HIV传播的重要手段之一。请根据相关知识回答下列问题：
（1）科学工作者利用转基因技术研制 HIV疫苗取得了一定进展，下图是该技术的操作简要路径（①②③表示操作步骤）：
图中②表示_________________，目的基因的载体有__________________（答出三种）， 目的基因_______________________的过程称为转化。要检测目的基因是否插入酵母菌的DNA，可采用___________________技术，利用探针检测酵母菌的基因，如果出现___________，就表明目的基因已插入酵母菌DNA中。
（2）在基因工程中将重组质粒导入不同的受体细胞可采用不同的方法，若是导入植物细胞，采用最多的方法是______________________，若是导入大肠杆菌，一般情况下，需要制备感受态细胞，原因是____________________________________________。
【答案】基因表达载体的构建 质粒、噬菌体、动植物病毒、噬菌体衍生物等 进入受体细胞并维持稳定和表达 DNA分子杂交 杂交带 农杆菌转化法 未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA）的能力极弱
【解析】
基因工程的操作步骤：获取目的基因、基因表达载体的构建、把目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定。据图分析，①是通过逆转录的方法获取目的基因的过程，②是基因表达载体的构建过程，③是将目的基因导入受体细胞的过程。
（1）根据以上分析已知，图中②表示构建基因表达载的过程；在基因工程中使用的载体有质粒、噬菌体衍生物、动植物病毒等；目的基因进入受体细胞并维持稳定和表达的过程称为转化。要检测目的基因是否插入受体细胞内的DNA上，常用的检测方法是采用DNA分子杂交技术，即利用含有放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段做为探针检测受体细胞的基因，如果出现杂交带，就表明目的基因已插入受体细胞DNA中。
（2）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，农杆菌能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，将质粒上的T-DNA转移到受体细胞；大肠杆菌属于微生物，由于未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA）的能力极弱，因此作为受体细胞需要经过钙离子处理使其处于感受态，使之更容易吸收周围环境中的DNA
