题目内容
【题目】青蒿素是最有效的抗疟疾药物，但野生黄花蒿青蒿素产量低，为缓解青蒿素供应不足的状况，科学家将tms基因和tmr基因导入黄花蒿的愈伤组织从而获得了黄花蒿的冠瘿组织，改造过程用到的部分结构如图。
（1）科学家将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞的常用方法是_____________________。
（2）图中结构P、T是基因成功转录的保证，其中结构P的作用是_______________________。为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并将含有目的基因的细胞筛选出来，图中还缺少的结构是___________________________________________。
（3）在获得转基因的冠瘿组织过程中，__________________________是核心步骤，在具体操作中常常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因和运载体的两端分别进行切割，这样做的好处是______________________________________________________。
（4）要检测目的基因是否插入到冠瘿组织细胞的染色体DNA上，可采用_____________技术。
（5）与愈伤组织相比，冠瘿组织的生长速度更快，原因可能是____________________________________。
【答案】农杆菌转化法 RNA聚合酶识别和结合的部位 标记基因 基因表达载体的构建（或：构建基因表达载体） 可以避免目的基因和运载体的自身连接成环和反向连接 DNA分子杂交 tms和tmr基因编码产物控制合成了生长素和细胞分裂素，促进了冠瘿组织的生长
【解析】
本题考查基因工程的原理、工具及操作步骤，基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，一个完整的基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因、复制原点等。
（1）将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。
（2）一个完整的基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因、复制原点等。图中结构P、T是基因成功转录的保证，由于T是终止子，则结构P是启动子。启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位。标记基因的作用是：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。所以为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并将含有目的基因的细胞筛选出来，图中还缺少的结构是标记基因。
（3）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，因此在获得转基因的冠瘿组织过程中，基因表达载体的构建是核心步骤。在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和运载体的自身连接成环和反向连接，一般选用两种限制酶分别对目的基因、运载体进行切割。
（4）检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因可采用DNA分子杂交技术。
（5）图中结构属于目的基因的是tms和tmr，分别编码产物控制合成生长素和编码产物控制合成细胞分裂素。促进了冠瘿组织的生长，所以与愈伤组织相比，冠瘿组织的生长速度更快。
