Question

下表中列出几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，请回答下列问题

限制酶	BamHⅠ	Hind Ⅲ	EcoRⅠ	SmaⅠ
识别序列及 切割位点	G↓GATC C C CTAG↑G	A↓AGCT T T TCGA↑A	G↓AATT C C TTAA↑G	CCC↓GGG GGG↑CCC

(1)一个图Ⅰ所示的质粒分子经SmaⅠ切割后，含有         个游离的磷酸基因

(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越               

(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是                                           .

(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BmaHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止              。

(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入                酶

(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了                。

(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在          的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测

 

Answer 1

【答案】

（1）2  （2）强  （高） （3）会破坏质粒上唯一标记基因和外源DNA的目的基因 （4）质粒及目的基因自身连接 （5）DNA连接  （6）筛选和鉴定重组质粒是否导入受体细胞（7）蔗糖

【解析】略