Question

【题目】在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，需要选育能高效降解该除草剂的细菌。请完成下列选育的实验方案：

步骤一：菌种浸出液的制备：

从_______________中获取一定量的样本，然后置于无菌水中，震荡一定时间，备用。

步骤二：配置菌种选育培养基并灭菌：

所配制的培养基的特点是____________________和 _______________________。

步骤三：

（1）划线接种

（2）_________________________________________________________________。

（3）_________________________________________________________________。

（4）常用的接种划线工具是___________________。

某同学在纯化菌株时，划线接种后一段时间后，平板的第一划线区域长满致密的菌苔，第二划线区域无菌落，造成划线无菌落可能的操作失误是________________________。

Answer 1

【答案】使用过除草剂的土壤 固体 含不同浓度除草剂 在适宜的温度等条件进行倒置培养一定时间 观察选取在较高浓度下除草剂的培养基中大菌落 接种环 接种环灼烧后未冷却或接种划线未从第一区域开始

【解析】

（1）步骤一：由于该除草剂为含氮有机物，所以筛选能高效降解该除草剂的细菌，应在使用过除草剂的土壤取样，并使用含该除草剂为唯一氮源的选择培养基。
步骤二：所配制的培养基为固体培养基并需要配置含不同浓度除草剂的培养基。
步骤三：
（2）接种后应该进行培养，即在适宜的温度等条件进行倒置培养一定时间。
（3）观察选取在较高浓度下除草剂的培养基中的大菌落。
（4）平板划线法的接种工具是接种环。根据题意分析，该同学的失误是接种环灼烧后未冷却导致菌种被烫死，或接种划线未从第一区域开始，即二次划线起始时就没有菌种。