题目内容
【题目】人参是珍贵的药用植物,研究人员运用转基因技术构建乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞表达系统,为珍贵药用植物与疫苗联合应用开辟了新思路,其构建过裎如图所示,图中SmaⅠ、SstⅠ、EcoRV为限制酶。请回答相关问题:
(1)②的构建过程除限制酶外还需要_________酶;想要从②中重新获得HBsAg基因,所用的限制酶不能是EcoRV或SmaⅠ,原因是_____________________________。
(2)将重组质粒转入农杆菌常用__________处理細胞;要使目的基因成功整合到人参细胞的染色体上,该过程所采用的质粒应含有____________________。
(3)分析图可知,②中应含有的标记基因是_______________;过程⑤的目的是______________。
(4)该疫苗进入机体后可刺激机体产生能与乙肝病毒特异性结合的_____________,同时还能产生______使机体长期对乙肝病毒具有免疫力。
【答案】 DNA连接 两平末端连接后的重组序列不能再被EcoR V和Sma Ⅰ识别(重组质粒无这种限制酶的识别序列) 钙离子(Ca2+) T-DNA 氨苄青霉素抗性基因 筛选出含有HBsAg基因的人参细胞 抗体 记忆细胞
【解析】试题分析:本题主要考查基因工程、免疫调节。要求学生熟知基因工程的操作过程,尤其是限制酶的选择,以及体液免疫的过程。
(1)②为基因表达载体的构建,除需要限制酶外还需要DNA连接酶;EcoRV、SmaⅠ切割后得到的是平末端,然后用DNA连接酶连接后,所形成的重组序列不能再被EcoR V和Sma Ⅰ识别。
(2)将目的基因转入微生物的方法是钙离子处理細胞;农杆菌的质粒中含有一段可以转移的DNA,即T-DNA,它能将目的基因成功整合到人参细胞的染色体上。
(3)⑤过程中是将受体细胞放入氨苄青霉素中培养,以筛选出含有HBsAg基因的人参细胞,因此②中应含有的标记基因是氨苄青霉素抗性基因。
(4)在体液免疫中,疫苗可以刺激机体产生相应的抗体,同时还能产生记忆细胞使机体长期对乙肝病毒具有免疫力。