题目内容

【题目】新型冠状病毒和SARS病毒都会造成肺炎。下图是SARS-CoV S蛋白特异性单克隆抗体的制备过程。回答下列问题:

1)若只考虑细胞两两融合,图中甲理论上有________________种。

2)已知细胞合成DNADS两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。鼠的淋巴细胞有上述两种途径,但一般不分裂增殖:鼠的骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。根据该原理,在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤______________(填能或不能)筛选出A,原因是_____________________________

3)在 SARS-CoV S蛋白特异性单克隆抗体的制备过程中,需要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。一般来说,动物细胞培养需要的条件有__________________(至少答出两点);诱导动物细胞融合的方法有_________________________(至少答出两种)。

4 SARS-CoV S蛋白单克隆抗体______________(填能或不能)对新型冠状病毒发挥作用,理由是__________________________________

【答案】3 杂交瘤细胞DF途径被氨基嘌呤阻断后不能合成DNA,但可通过S途径合成DNA,不断分裂增殖 无菌、无毒环境,营养,温度、PH,气体环境 PEG、灭活的病毒、电激 不能 新型冠状病毒与SARS病毒的抗原不同,SARS-CoVS蛋白单克隆抗体,只能与SARS-CoVS蛋白发生特异性结合

【解析】

图示单克隆抗体的制备过程是:对小鼠注射抗原SARS-CoV S蛋白,从小鼠的脾脏中获取经过免疫的B细胞(即效应B细胞),将经过免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞,克隆化培养杂交瘤细胞(体内培养和体外培养),最后获取单克隆抗体。诱导动物细胞融合的方法有:物理法(离心、振动)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒);单克隆抗体的两次筛选:①筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞);②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群;两次抗体检测:专一抗体检验阳性。

1)只考虑细胞两两融合,甲理论上有3种融合细胞,包括两个骨髓瘤细胞融合的类型,两个已免疫的B细胞融合的类型,一个骨髓瘤细胞与一个已免疫B细胞融合的类型。

2)在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤后,已免疫的B细胞及其彼此融合的细胞能利用S途径进行DNA合成,但是无法进行分裂增殖,骨髓瘤细胞的D合成途径被阻断,所以骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖,只有骨髓瘤细胞与已免疫的B细胞融合形成杂种细胞能利用S途径合成DNA并进行分裂增殖从而存活下来,所以在含甲的混合培养液中添加氨基嘌呤能筛选出杂交瘤细胞A

3)动物细胞培养的条件包括以下几点:①无毒、无菌的环境;②营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等);血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份)适宜的温度和pH等;诱导动物细胞融合的方法有物理诱导法、化学试剂诱导法和生物诱导法。

4)抗体具有特异性,针对特定的病毒人体会产生相对应的抗体,故相应的SARS-CoVS蛋白单克隆抗体只会对SARS这种病毒起作用,不能对新型冠状病毒发挥作用。

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