题目内容

【题目】利用“荧光素一荧光素酶生物发光法”可以对食品中细菌的含量进行检测:

①将待测样品研磨后离心处理,取一定量上清液放入分光光度计(测定发光强度的仪器)反应室内,加入适量的荧光素和荧光素酶,在适宜条件下进行反应;

②记录发光强度并计算ATP含量;

③测算出细菌数量。

分析并回答下列问题:

(1)荧光素接受_______提供的能量后就被激活,在荧光素酶的作用下形成氧化荧光素并且发出荧光。根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量,原因是发光强度与ATP含量成_______(填“正比”或“反比”)。根据ATP含量进而测算出细菌数量的依据是每个细菌细胞中ATP含量___________

(2) “荧光素一荧光素酶生物发光法”中涉及的能量转换是_______;生物细胞中ATP的水解一般与_______(填“吸能反应”或“放能反应”)相联系。

(3)研究人员用不同条件处理荧光素酶后,测定酶浓度与发光强度的关系如下图所示。

其中经_______(填“高浓度盐溶液”、“Hg2+”或“高温”)处理后的酶活性可以恢复,Hg2+处理后酶活性降低可能是因为_______。若要节省荧光素酶的用量,可以使用_______处理。

【答案】ATP 正比 大致相同且相对稳定 (ATP中活跃的)化学能→光能 吸能反应 高浓度盐溶液 破坏了酶的空间结构 Mg2+

【解析】

1、ATP又叫三磷酸腺苷,简称为ATP,其结构式是:A-P~P~P。A-表示腺苷、T-表示三个、P-表示磷酸基团。“~”表示高能磷酸键。ATP是一种含有高能磷酸键的有机化合物,它的大量化学能就储存在高能磷酸键中。ATP水解释放能量断裂的是末端的那个高能磷酸键。
2、ATP是生命活动能量的直接来源,但本身在体内含量并不高。
3、ATP来源于光合作用和呼吸作用。
4、放能反应一般与ATP的合成相联系,吸能反应一般与ATP的水解相联系。

(1)ATP是生命活动的直接能源物质,所以荧光素接受ATP提供的能量后就被激活,在荧光素酶的作用下形成氧化荧光素并且发出荧光。ATP数量越多,提供能量越多,发光强度越大。每个细菌细胞中ATP含量大致相同且相对稳定,故可以根据ATP含量进而测算出细菌数量。

(2)“荧光素一荧光素酶生物发光法”中涉及的能量转换是ATP中高能磷酸键中储存的活跃化学能转化形成光能。ATP水解可为生命活动提供能量,生物细胞中ATP的水解一般与吸能反应相联系。

(3)比较曲线中“高浓度盐溶液”、“Hg2+”或“高温”对酶处理的曲线可知,其中经高浓度盐溶液处理后的酶活性可以恢复。Hg2+处理后会破坏荧光素酶(蛋白质)空间结构,导致酶活性下降。据图分析,用Mg2+处理荧光素酶后,在较低荧光素酶浓度下就能达到较高发光强度,所以若要节省荧光素酶的用量,可以使用Mg2+处理。

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