题目内容
【题目】用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示,下列叙述错误的是( )
A.过程①指 mRNA 的反转录过程,需解旋酶和 DNA 聚合酶
B.过程②从 cDNA 中获得的CarE基因无启动子和内含子
C.过程③须用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于感受态状态
D.过程④得到的工程菌是指能使 CarE 基因高效表达的菌类细胞株系
【答案】A
【解析】
分析题图:图示是用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程图,其中①为逆转录过程,②表示获取目的基因,③表示将目的基因导入受体细胞,④表示筛选获取工程菌。
A、过程①指mRNA的反转录过程,需逆转录酶,A错误;
B、cDNA是以mRNA为模板逆转录形成的,其中不含启动子和内含子,因此过程②从cDNA中获得的CarE基因无启动子和内含子,B正确;
C、过程④将目的基因导入微生物细胞常用感受态转化法,即用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于感受态状态,C正确;
D、过程④得到的工程菌是指能使CarE基因高效表达的菌类细胞株系,D正确。
故选A。
【题目】利用转基因的工程菌生产药用蛋白,近些年在我国制药行业中异军突起。图1表示基因工程常用的一种质粒。
回答有关问题:
(1)SphⅠ和SacⅠ两种限制酶识别并切割不同的DNA序列,将目的基因和质粒都通过SphⅠ和SacⅠ切割,可以避免_______________。拼接成重组质粒,需要加入_______________酶才能完成。
(2)各限制酶在该质粒上分别只有一处识别序列,有关质粒和重组质粒的限制酶酶切片段长度如下表所示。已知质粒被切除的片段长度为0.5kb,则与质粒结合的目的基因长度为_____
kb。质粒上ClaⅠ与PstⅠ区域之间的长度为2.4kb(图1所示),结合图2分析目的基因上ClaI、PstⅠ两种限制酶的切割位点分别为___________(填“a和b”或“b和a”)。
质粒 | 重组质粒 | |
BglⅡ | 6.0kb | 7.1kb |
ClaⅠ | 6.0kb | 2.3kb, 4.8kb |
PstⅠ | 6.0kb | 1.5kb, 5.6kb |
(3)在筛选导入重组质粒的受体菌时,培养基中加入适量的________________,使导入重组质粒和普通质粒的受体菌都能在该培养基上生长。为了进一步筛选,可以利用抗原-抗体杂交的方法,若出现______________,则该受体菌可以作为工程菌。
(4)若要对药用蛋白的结构进行改造,可利用____________工程对目的基因进行修饰。