Question

4．目前栽培的主要香蕉品种是三倍体，不结种子，因此无性繁殖成了主要种植方式．香蕉生产最容易遭受香蕉束顶病毒（BBTV）侵染，影响了全世界许多地区的香蕉产业．为提高其产量，某生物小组利用基因工程技术培育抗BBTV香蕉．
（1）阐述三倍体香蕉不结种子的原因减数分裂过程中发生联会紊乱，不能形成正常生殖细胞．
（2）为获取抗BBTV基因，可从含有该抗病基因的细胞中提取对应RNA，构建cDNA文库从而获得目的基因．在获得抗病基因后可通过RCR技术技术短时间大量扩增，该技术需要Taq酶．
（3）培育抗BBTV香蕉的核心是构建基因表达载体，构建好的基因表达载体必须有标记基因，标记基因的作用是为了鉴别受体细胞是否含有目的基因从而将含有目的基因的细胞筛选出来．
（4）将抗BBTV基因导入香蕉植物细胞常用的方法是农杆菌转化法．
（5）在抗BBTV香蕉培育过程中，用放射性同位素标记的抗BBTV基因作探针进行分子杂交检测是否转录，用用香蕉束顶病毒（BBTV）侵染香蕉植株方法从个体水平鉴定香蕉植株的抗病性．

Answer 1

分析 1、PCR技术：
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
（2）原理：DNA复制．
（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
（4）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
3、目的基因分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．

解答 解：（1）由于三倍体植株体内细胞减数分裂过程中发生联会紊乱，不能形成正常生殖细胞，所以三倍体香蕉不结种子．
（2）为获取抗BBTV基因，可从含有该抗病基因的细胞中提取对应RNA，构建cDNA文库从而获得目的基因．在获得抗病基因后可通过RCR技术技术短时间大量扩增，该技术需要Taq酶．
（3）培育抗BBTV香蕉的核心是构建基因表达载体，构建好的基因表达载体必须有标记基因，标记基因的作用是为了鉴别受体细胞是否含有目的基因从而将含有目的基因的细胞筛选出来．
（4）将目的基因导入植物细胞的方法有：农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，将抗BBTV基因导入香蕉植物细胞常用的方法是农杆菌转化法．
（5）在抗BBTV香蕉培育过程中，用放射性同位素标记的抗BBTV基因作探针进行分子杂交检测是否转录，用用香蕉束顶病毒侵染香蕉植株方法从个体水平鉴定香蕉植株的抗病性．
故答案为：
（1）减数分裂过程中发生联会紊乱，不能形成正常生殖细胞
（2）cDNA       RCR技术     Taq
（3）鉴别受体细胞是否含有目的基因从而将含有目的基因的细胞筛选出来
（4）农杆菌转化法（2分）
（5）抗BBTV基因（目的基因）    用香蕉束顶病毒（BBTV ）侵染香蕉植株

点评 本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识秘能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力，属于考纲中识记、理解层次的要求．