Question

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如下图。据图回答下列问题：

（1）形成的PG反义质粒叫做_______________，它的构建过程是基因工程的核心，需要用到的工具酶有_______________。若已获取PG的mRNA，可通过__________获取PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是________，要实现此目的，还可以用______________法。

（2）要获取番茄的原生质体，通常要用到________________酶。用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有__________的培养基进行筛选。将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与__________互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达。若观察到__________，则可确定转基因番茄培育成功。

（4）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用__________技术；其中，愈伤组织经__________形成完整植株。

Answer 1