题目内容

【题目】双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)与脱氧核苷三磷酸(dNTP)的结构如图所示。已知ddNTP按碱基互补配对的方式加到正在复制的子链中后,子链的延伸立即终止。某同学要通过PCR技术获得被32p标记且以碱基“C”为末端的、不同长度的子链DNA片段。在反应管中已经有单链模板、引物、DNA聚合酶和相应的缓冲液等,还需要加入下列哪些原料

dGTPdATPdTTPdCTP dGTPdATPdTTP

α32p标记的ddCTP ④γ位32p标记的ddCTP

A.①③B.①④C.②③D.②④

【答案】A

【解析】

PCR条件包括:模板、引物、耐高温DNA聚合酶、四种脱氧核苷三磷酸(dNTP),还需要一定的离子浓度等。

PCR扩增DNA时,需要dGTPdATPdTTPdCTP作为原料,而脱氧核苷三磷酸(dNTP)连接到子链上时,会断掉2个高能磷酸键,为了获得被32p标记且以碱基“C”为末端的,32p标记应位于ddCTPα位,加入ddCTP后会终止子链的延伸,获得不同长度的子链DNA片段,此外还故需要①③,A正确。

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