题目内容
【题目】I．降钙素是一种多肽类激素，某科学机构为了研究一种新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条DNA单链，两条链形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平，获得双链DNA,过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：
（1）上述制备新型降钙素,运用的现代生物工程技术是________。Klenow酶是一种____________酶。两条DNA单链能合成部分双链DNA的原因是_______________________。
（2）获得的双链DNA经限制酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_____________。
②导入大肠杆菌时,要用________________处理。
③经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_______________________________________________。
II．请回答与动物细胞培养及胚胎工程有关的问题：
(1)欲获得牛的单个体细胞，需用__________________处理动物组织；在体外培养时，通常需在培养液中添加______________等天然成分。
(2)获取的卵子需培养到_______________时期才能用于核移植，通过核移植获得的动物称作______________。
(3)在胚胎分割技术中，需将牛囊胚的___________均分，可利用囊胚的__________细胞进行性别鉴定。
(4) 可用ES细胞分化出人造器官用于器官移植，优点是____________________________。
【答案】 蛋白质工程 DNA聚合酶 两条DNA单链中存在互补配对的碱基 标记基因 Ca2+ 合成的DNA单链较长，碱基发生了缺失 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 动物血清、血浆 减数第二次分裂中期（MII中期） 克隆动物 内细胞团 滋养层 免疫排斥反应弱，器官移植成功率高
【解析】【试题分析】
本题以“降钙素”为素材，考查蛋白质工程和胚胎移植等基础知识，需要考生从图文中获取有用的信息，再结合题意进行分析作答。关于胚胎工程部分，题目比较简单，只要记住课本上的相关知识，再结合题目内容即可顺利作答。
I．（1）根据材料中“从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，获得双链DNA”，可以确定运用的现代生物工程技术是蛋白质工程；观察图可以发现通过Klenow酶能够将单链DNA延伸，所以它是一种DNA聚合酶；由于两条DNA单链中存在互补配对的碱基，所以两条DNA单链能合成部分双链DNA。
（2）①标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。所以要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有标记基因。
②导入大肠杆菌时,要用Ca2+处理，使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，即变成感受态细胞。
③由题意可知，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。因此，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是合成的DNA单链较长，碱基发生了缺失。
II．（1）欲获得牛的单个体细胞，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织；在体外培养时，通常需在培养液中添加动物血清、血浆等天然成分。
（2）获取的卵子需培养到减数第二次分裂中期（MII中期）时期才能用于核移植，通过核移植获得的动物称作克隆动物。
（3）在胚胎分割技术中，需将牛囊胚的内细胞团均分，可利用囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定。
（4）ES细胞可以用来培育各种组织器官，用于器官移植，其优点是免疫排斥反应弱，器官移植成功率高。
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