题目内容
【题目】已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：
（1）实验步骤①所代表的反应过程是________________。
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性酶和________________酶，后者的作用是将用限制酶切割的________________和_______________连接起来。
（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能_______________，也不能_________________________。
（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用_________________________与_____________________ 的血清进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列_______（相同，不同），根本原因是______
【答案】 逆转录 DNA连接 载体 S基因 复制 合成S基因的mRNA 大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人 相同 表达蛋白质所用的基因相同
【解析】试题分析：本题主要考查基因工程。要求学生熟知目的基因的获取、基因表达载体的构建方法、目的基因的检测与鉴定方法。
（1）据图可知，过程①是以RNA为模板合成DNA的过程，即是逆转录。
（2）基因表达载体的构建需要使用限制酶和DNA连接酶；DNA连接酶的作用是将目的基因（S基因）和运载体连接在一起。
（3）若把S基因直接导入大肠杆菌，S基因很难把自己整合到细菌的DNA上，这样的S基因是无法复制和转录（合成S基因的mRNA）的；
（4）要想检验大肠杆菌中表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同作用，必须要获得病毒S蛋白，根据免疫知识，SARS康复病人血清应该含有该物质。检测蛋白质的方法是抗原—抗体杂交，即将大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清（含有抗S蛋白的抗体）结合。
（5）由于基因相同，因此所表达的蛋白质中氨基酸序列也应相同。
