Question

【题目】某转基因牛的生产技术流程如图。请回答：

（1）利用过程①的方法构建的基因文库是___________（填“基因组文库”或“部分基因文库”）。利用PCR技术大量扩增此目的基因的前提是__________，以便合成引物；PCR扩增过程需要______催化。

（2）转入生长激素基因的牛可通过乳腺细胞分泌乳汁来生产人生长激素，过程②中，将目的基因与____________的启动子等调控组件重组在一起构建重组质粒，通过_________法导入受精卵中，然后利用胚胎工程的___________（答出2项）技术手段获得转基因牛。

（3）该转基因牛进入泌乳期后，其分泌的乳汁中并未含有人生长激素，可能的原因是____________________。

Answer 1

【答案】部分基因文库 要有一段已知目的基因的核苷酸（碱基）序列 热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 乳腺蛋白基因 显微注射 早期胚胎培养、胚胎移植 导入的目的基因未能表达或目的基因与运载体反向连接

【解析】

分析题图：图示是生产某种转基因牛的操作流程，涉及到的技术有基因工程、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等。图中过程①表示利用反转录法获得目的基因（生长激素基因）。过程②表示构建基因表达载体，是基因工程的核心步骤，基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因、标记基因等。

(1) 过程①表示利用反转录法获得目的基因（生长激素基因）。因mRNA只是部分基因转录的产物，所以利用过程①的方法构建的基因文库只包含了一种生物的一部分基因，是部分基因文库。利用PCR技术大量扩增目的基因的前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。PCR扩增过程需要热稳定DNA聚合酶（Taq酶）催化。

(2) 过程②表示构建基因表达载体。转入生长激素基因的牛可通过乳腺细胞分泌乳汁来生产人生长激素，在构建基因表达载体时，应将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起构建重组质粒，再通过显微注射法将重组质粒导入受精卵中，然后利用早期胚胎培养技术将导入重组质粒的受精卵培育成早期胚胎，进而利用胚胎移植技术等手段获得转基因牛。

(3) 该转基因牛进入泌乳期后，其分泌的乳汁中并未含有人生长激素，可能的原因是：导入的目的基因未能表达，或者是目的基因与运载体反向连接，或者是目的基因未成功导入。