题目内容
【题目】某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中,准备从猪的血液中初步提取血红蛋白,设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下:
(1)样品处理过程中红细胞的洗涤要用________________反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,破碎细胞的原理是_________________________________________。
(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是去除________________杂质。
(3)凝胶色谱法又叫______________________,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对_____分子物质有很高的分离效果。
(4)电泳法是利用了待分离样品中各种分子的带电性质及分子大小、形状等的差异,而产生不同迁移__________,实现各种分子的分离。常用的电泳法有_______________凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
【答案】生理盐水 渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水胀破) 小分子 凝胶色谱技术(或又称分子排阻色谱法、分配色谱法) 高 速率 琼脂糖
【解析】
蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。
(1)洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白,需要用生理盐水反复冲洗、离心。当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞会吸水胀破,故可以向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌,破碎红细胞。
(2)透析可以去除样品中分子量较小的杂质。
(3)凝胶色谱法又叫分配色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。该技术对高分子物质有很高的分离效果。
(4)电泳法是利用了待分离样品中各种分子的带电性质及分子大小、形状等的差异,而产生不同迁移速度,实现各种分子的分离。常用的电泳法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。