题目内容
【题目】大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，是一种常用的生物学实验材料，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。
（1）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
根据用途划分，该培养基属于__________（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中__________换成__________，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红·美蓝换成__________。
（2）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是____________________。
（3）培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。对已使用过的培养基及其培养物必须经过______________________处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。
（4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1 mL水样至盛有9 mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为________。
（5）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为_____________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是____________________________。
【答案】 鉴别 蛋白胨 尿素 酚红指示剂 平板划线法和稀释涂布平板法 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 灭菌 5.6×108 黑色 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌
【解析】【试题分析】
本题考查的培养、分离计数的相关知识，比较容易作答。需要考生理解所学知识的要点，并把握知识间的内在联系，在梳理所学知识的同时结合题意分析作答。第（4）小题需要用到公式：单位样品中的菌落数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下的平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL）M代表稀释的倍数。据此答题。
（1）伊红美蓝是鉴定大肠杆菌的试剂，因此该培养基从用途上属于鉴别培养基；若要分离能分解尿素的细菌，则需要保证培养基中以尿素为唯一氮源，即将蛋白胨换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂，即需将伊红·美蓝换成酚红指示剂。
（2）培养微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
（3）在接种前检测固体培养基是否被污染，通常采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生；对已使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
（4）题中稀释的倍数是103，三个菌落的平均数=（55+56+57）÷3=56个，图中则每毫升样品中菌株数=56÷0.1×103=5.6×105个，所以每升土壤浸出液中的菌株数=5.6×105×103=5.6×108个。
（5）由题意可知，大肠杆菌的代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色，所以检测大肠杆菌数量时，在平板培养基中应选择颜色为黑色的菌落进行计数；通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数的原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。
