题目内容
【题目】黄曲酶毒素B1（AFB1）是一种较强的致癌物质，危害人类健康。为了准确检测AFBI的浓度，科学家尝试用基因工程的方法开发抗AFE1抗体，进行了如下实验。回答下列问题：
（1）用___________兔疫小鼠，取小鼠脾脏细胞与___________融合，得到杂交瘤细胞。
（2）提取杂交瘤细胞的总RNA，经___________得到cDNA，再利用特异性引物经过___________扩增得到抗AFB1抗体基因。科学家选用杂交瘤细胞而非被免疫小鼠的脾脏细胞的原因:__________________。
（3）随后，用限制NcoⅠ和BamHⅠ酶切以上抗AFB1抗体基因和质粒，经DNA连接酶处理后将重组质粒导如大肠杆菌，为得到抗AFB1抗体，需对成功转化的大肠杆菌进行破碎处理，然后才能提纯得到目标抗体的原因是_________________________________。
【答案】AFB1骨髓瘤细胞逆转录PCR杂交瘤细胞表达（或含有）抗AFB1抗体的基因，且可无限增殖方便保存大肠杆菌是原核生物，无内质网和高尔基体，无法分泌抗体
【解析】
单克隆抗体的制备过程：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。基因工程的基本步骤：目的基因的获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
（1）根据题意分析，该抗体是由黄曲酶毒素B1诱导形成的，因此应该用黄曲酶毒素B1（AFB1）免疫小鼠，然后从小鼠的脾脏中提取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞。
（2）由RNA得到cDNA的过程为逆转录；得到的cDNA可以利用PCR技术进行扩增；由于杂交瘤细胞可以表达（或含有）抗AFB1抗体的基因，且可无限增殖方便保存，所以科学家选用杂交瘤细胞而非被免疫小鼠的脾脏细胞。
（3）由于大肠杆菌是原核生物，无内质网和高尔基体，无法分泌抗体，因此需对成功转化的大肠杆菌进行破碎处理，然后才能提纯得到目标抗体。
【题目】A、B、C、D、E为五种生物材料，分别与四种试剂发生颜色反应，实验现象如下表：
化学试剂 | 生物材料 | ||||
A鸡血细胞 | B花生种子 | C蛙皮肤细胞 | D棉花纤维 | E霉菌 | |
甲基绿溶液 | + | _ | + | _ | _ |
斐林试剂 | _ | _ | _ | _ | _ |
苏丹Ⅲ溶液 | _ | + | _ | _ | _ |
双缩脲试剂 | + | _ | + | _ | + |
（“＋”表示有颜色反应； “-”表示无颜色反应）
请回答下列问题：
（1）A、C与甲基绿发生颜色反应，说明两种细胞内含有________________。
（2）B与苏丹Ⅲ的反应可以说明花生种子中含有________________。
（3）D与四种试剂都无颜色反应。若将E提取物与D材料混合，一段时间后混合液能与斐林试剂发生反应，生成砖红色沉淀，这种颜色反应说明E提取物中有水解棉花纤维的__________，从而混合液中有________________生成。