Question

【题目】检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施．请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题：

（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为_____。如图所示的四种菌落分布图中，图_____不是由该方法得到的。

（2）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至103稀释度．各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为_____。

（3）有三种材料或用具需要清毒或灭菌：（1）培养细菌用的培养基与培养皿；（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管；（3）实验操作者的双手．其中需要消毒的是_____（填序号），需要灭菌的是_____（填序号）。

下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

成分	含量
蛋白胨、牛肉膏	10.0g
乳糖	5.0g
蔗糖	5.0g
K2HPO4	2.0g
显色剂	0.2g
琼脂	12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

根据用途划分该培养基属于_____培养基（选择、鉴别）。该培养基中的碳源是_____。利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养．与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入_____

（4）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是______

A．制作果酒 B．由果酒制作果醋 C．制作泡菜 D．制作腐乳

兔子的毛色有灰色、青色、白色、黑色、褐色等，控制毛色的基因在常染色体上。其中，灰色由显性基因（B）控制，青色（b1）、白色（b2）、黑色 （b3）、褐色（b4）均为B基因的等位基因。

（1）已知b1、b2、b3、b4之间具有不循环但有一定次序的完全显隐性关系 （即如果b1对b2显性、b2对b3显性，则b1对b3显性）．为探究b1、b2、b3、b4之间的显性关系，有人做了以下杂交实验（子代数量足够多，雌雄都有）：

甲：纯种青毛兔×纯种白毛兔→F1为青毛兔；

乙：纯种黑毛兔×纯种褐毛兔→F1为黑毛兔；

丙：F1青毛兔×F1黑毛兔。

请推测杂交组合丙的子一代可能出现的性状，并结合甲、乙的子代情况，对之间的显隐性关系作出相应的推断：

①若表现型及比例是_____，则b1、b2、b3对b4显性，b1、b2对b3显性，b1对b2显性（可表示为b1＞b2＞b3＞b4，回答以下问题时，用此形式表示）

②若青毛：黑毛：白毛大致等于2：1：1，则之间的显隐性关系是_____。

③若黑毛：青毛：白毛大致等于2：1：1，则b1、b2、b3、b4之间的显隐性关系是_____。

（2）假设b1＞b2＞b3＞b4，若一只灰色雄兔与群体中毛色不同但数量相同的纯种雌兔交配，子代中灰毛兔占50%，青毛兔、白毛兔、黑毛兔和褐毛兔各占12.5%， 该灰毛雄兔的基因型是_____。若让子代中的青毛兔与白毛兔交配，后代的表现型及比例是_____。

Answer 1

【答案】（稀释）涂布平板法 D 5.6×108 （3） （1）（2） 选择 乳糖、蔗糖（蛋白胨、牛肉膏） 植物激素（或生长素和细胞分裂素） B C 青毛：白毛大致等于1：1 b1＞b3＞b2＞b4 b3＞b1＞b2＞b4 Bb4 青毛：白毛：褐毛＝2：1：1

【解析】

（1）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。由图中四种菌落分布情况可知，图D不是稀释涂布平板法获得的，而是利用平板划线法得到的。

（2）首先计算三个培养基菌落数的平均值，然后再计算每升原水样中大肠杆菌数，即（ 55+56+57）÷3÷0.1×103×1000=5.6×108个。

（3）实验操作者的双手需要进行消毒处理，而培养细菌用的培养基与培养皿需要采用高压蒸汽灭菌法进行菌，玻棒、试管、烧瓶和吸管等需要采用干热灭菌法进行灭菌。

（4）该培养基中含有显示剂，属于鉴别培养基；该培养基的碳源是乳糖、蔗糖、蛋白胨、牛肉膏；与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入植物激素（或生长素和细胞分裂素）。

（5）参与果酒制作的是酵母菌，属于真核生物；参与果醋制作的是醋酸菌，属于原核生物；参与泡菜制作的是乳酸菌，属于原核生物；参与腐乳制作的是毛霉等微生物，属于真核生物。大肠杆菌是原核生物，所以细胞结构与大肠杆菌相同的是B、C。

具体分析可知：甲：纯种青毛兔（b1b1）×纯种白毛兔（b2b2）→F1为青毛兔（b1b2）；乙：纯种黑毛兔（b3b3）×纯种褐毛兔（b4b4）→F1为黑毛兔（b3b4）；丙：F1青毛兔（b1b2）×F1黑毛兔（b3b4）→b1b4、b1b3、b2b4、b2b3。分析如下：

（1）①丙的子代的基因型及比例为b1b4、b1b3、b2b4、b2b3=1：1：1：1，若b1＞b2＞b3＞b4，则b1b4和b1b3均表现为青色，b2b4和b2b3均表现为白色，所以丙的子代中青毛：白毛大致等于1：1。

②丙的子代的基因型及比例为b1b4、b1b3、b2b4、b2b3=1：1：1：1，若青毛：黑毛：白毛大致等于2：1：1，则b1b4和b1b3均表现为青色，即b1＞b4、b1＞b3,b2b4表现为白色，即b2＞b4,b2b3表现为黑色，即b3＞b2，所以b1、b2、b3、b4之间的显隐性关系是b1＞b3＞b2＞b4。

③丙的子代的基因型及比例为b1b4、b1b3、b2b4、b2b3=1：1：1：1，若黑毛：青毛：白毛大致等于2：1：1，则b1b3和b2b3均表现为黑色，即b3＞b2、b3＞b1；b1b4表现为青色，即b1＞b4；b2b4表现为白色，即b2＞b4，所以b1、b2、b3、b4之间的显隐性关系是b3＞b1＞b2＞b4。

（2）假设b1＞b2＞b3＞b4，若一只灰色雄兔（B_）与群体中多只不同毛色的纯种雌兔交配，子代中灰毛兔占50%，青毛兔、白毛兔、黑毛兔和褐毛兔各占12.5%。说明该灰毛雄兔的基因型是Bb4，纯合雌兔的基因型和比例为b1b1：b2b2：b3b3：b4b4=1:1:1:1，则子代中青毛兔的基因型为b1b4，白毛兔的基因型为b2b4，让子代中的青毛兔与白毛兔交配，后代的基因型及比例为b1b2（青）：b1b4（青）：b2b4（白）：b4b4（褐）=1：1：1：1，所以子代表现型及比例为青毛：白毛：褐毛=2：1：1。