题目内容
【题目】在生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题
(1)下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上,把混合的菌种逐步稀释分散获得______________菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。
(3)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO47H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌,则应除去上述培养基成分中的________,并加入______________和________物质,以补充其生活所需的______________和________。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨,使培养基pH发生改变,酚红由黄变红,使菌落周围呈现红色。
(4)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2ml稀释液涂布,得到以下统计结果:
甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;
乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;
丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;
在三位同学的统计中,____________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果,每毫升原液中的菌体数是______________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量______________。
(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行_____________处理后,才能倒掉。
【答案】
(1)平板划线法 单个 倒置
(2)NaNO3 尿素 葡萄糖 氮源 碳源 (要求:前后对应) 脲酶
(3)乙 1.16×109 少
(4) 灭菌
【解析】
(1)由图可知,其采取的是平板划线法,该方法能把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。接种后培养基应倒置放在37℃恒温培养箱中进行培养。
(2)培养分解尿素的细菌,其氮源是尿素,所以培养基中要除去含氮物质,即去除NaNO3,并加入尿素和葡萄糖,以提供氮源和碳源。尿素分解菌能合成脲酶将尿素分解为氨,使培养基pH发生改变,酚红由黄变红,使菌落周围呈现红色,所以培养基中要加入酚红作指示剂。
(3)甲同学只涂布了1个平板,实验数据说服力不够 丙同学其中一个平板的计数结果与另两个相差太远,说明操作过程出现错误,数据缺乏正确性,所以乙同学的统计结果是相对准确可信的。在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4,那么每毫升样品(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL) 中的菌落数是=106×23.2×1/0.2=1.16×109个。当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察的是一个菌落,因此用这种方法测定得密度偏低。
(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理后,才能倒掉。