题目内容
【题目】人乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，主要由乳腺上皮细胞表达和分泌。它不仅参与铁的转运，而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能，被认为是一种新型抗菌、抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。下图表示用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，请据图回答：
（1）在构建重组质粒时，为防止目的基因和载体自身环化，应先选用__________（填具体类型）限制性核酸内切酶处理人乳铁蛋白基因和载体，然后用DNA连接酶处理得到重组质粒。
（2）在进行①操作过程中，为了获得更多的卵子，应对良种母奶牛进行__________处理，从公牛中获得的精子需要经过__________才能与卵细胞结合。
（3）过程③常用__________方法将重组质粒导入到受精卵中。图中采用的生物工程技术④和⑥分别是__________和胚胎移植，前者__________（填需要或不需要）添加胚胎成纤维细胞，后者在操作前通常取囊胚期的滋养层细胞进行__________。
（4）对代孕母牛要进行__________处理，使之与供体的生理状况保持相同，转基因奶牛成功的标志是__________，由此得到的转基因奶牛__________（填属于或不属于）克隆动物。
【答案】Smal和PstI 超数排卵 获能处理 显微注射法 （早期）胚胎体外培养 不需要 性别鉴定 同期发情处理 转基因母牛的乳汁中含有人乳铁蛋白 不属于
【解析】
分析题图，图示是利用奶牛乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的流程图，其中①表示卵细胞的采集和培养；②表示精子的采集和获能；③表示将目的基因导入受体细胞；④⑤表示早期胚胎培养和得到桑椹胚或囊胚；⑥表示胚胎移植。
（1）由图示可知，为了防止目的基因、质粒的任意连接和自生环化，应该用不同的限制酶分别切割目的基因和质粒，据图分析应该采用SmaⅠ和PstⅠ限制性核酸内切酶处理人乳铁蛋白基因和运载体，然后用DNA连接酶处理得到重组质粒。
（2）在进行①表示卵细胞的采集和培养，操作过程中，为了获得更多的卵子，应对良种母奶牛注射促性腺激素，进行超数排卵处理，从公牛中获得的精子需要经过获能处理才能与卵细胞结合。
（3）过程③表示将目的基因导入受体细胞，常用显微注射方法将重组质粒导入到受精卵中；图中采用的生物工程技术④和⑥分别是早期胚胎培养和胚胎移植，前者不需要添加胚胎成纤维细胞，后者在操作前通常取囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定。
（4）对代孕母牛要进行同期发情处理，使之与供体牛的生理状况保持相同；转基因奶牛成功的标志是母牛的乳汁中含有人乳铁蛋白；因未采用核移植技术，转基因奶牛不属于克隆动物。
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