Question

【题目】淀粉酶在生产生活中有广泛应用。下面是透明圈法筛选高产淀粉酶目标菌的示意图。回答下列问题。

（1）配制培养微生物的培养基一般都要求在含有_____等主要营养物质的基砒上，还需满足微生物生长对_______的要求。将微生物接种到已灭菌的培养基上，应在_____附近进行操作。

（2）用加有可溶性淀粉的平板筛选淀粉酶产生菌株，发现培养基上长出甲、乙菌落，碘染后发现乙菌落周围有透明圈（如图所示），由此说明乙菌落中含有______，产生透明圈的原因是_______________________________。

（3）对乙菌落再用稀释涂布平板法进一步接种培养，由于此方法用稀释度足够高的菌液将___________，能对目标菌进行________和计数，从而获取目标菌。

Answer 1

【答案】水、碳源、氮源、无机盐 pH、特殊营养物质、氧气 酒精灯火焰 分解淀粉的目标菌 含淀粉的培养基原本不透明，但在淀粉酶的作用下，淀粉水解为单糖并为目标菌所利用，碘染后在菌落附近就出现透明圈了 聚集在一起的微生物分散为单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌的菌落 分离、纯化

【解析】

微生物的培养需要提供的基本营养物质：碳源（提供所需碳元素的营养物质）、氮源（提供所需氮元素所需的营养物质）、水、无机盐、特殊营养物质——生长因子（维生素、氨基酸、碱基等），微生物培养所需的条件：pH、氧气条件、特殊营养等；为了防止微生物的感染，实验操作过程应在无菌条件下完成——在酒精灯火焰旁操作；透明圈法的基本原理：含有可溶性淀粉的培养基中培养微生物，生出菌落后，将菌落用碘液处理，若菌种能产生淀粉酶，则其附近的淀粉被水解为还原糖，因此会出现“透明圈”；统计菌落数目时，若样品的稀释度足够高，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；通过统计平板上的菌落数，就能测出样品大约的活菌数。

（1）培养基的成分包括水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，以及pH、特殊营养物质、氧气条件等。

（2）乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌落含有分解淀粉的目标菌，故应选择乙菌落进一步纯化从而得到目标菌。

（3）对乙菌落再用稀释涂布平板法进一步接种培养，由于此方法用稀释度足够高的菌液聚集在一起的微生物分散为单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌的菌落，能对目标菌进行分离、纯化和计数、从而获取目标菌。