题目内容
【题目】人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。图是以基因工程技术获取重组HSA的两条途径，其中报告基因表达的产物能催化无色物质K呈现蓝色。
据图回答下列问题：
（1） 在利用PCR技术获取目的基因的过程中，以从生物材料中提取的DNA作为模板，利用____________寻找HSA基因的位置并进行扩增，PCR的原料是____________________。
（2）已知碱性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸，构建表达载体的过程中用该酶处理Ti质粒，但HSA基因不用碱性磷酸酶处理，这样做的目的是_____________________________________，在上述条件下DNA连接酶可以使HSA基因和Ti质粒之间形成_____个磷酸二酯键。
（3） 过程①中需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让______________进入植物细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含_____________的培养基上筛选出转化的植物细胞。
（4） ③过程中将目的基因导入绵羊受体细胞，采用最多，也是最为有效的方法是______________，还可以使用__________________作为载体，实现转化。
（5） 为检测HSA 基因的表达情况，可提取受体细胞的 __________________，用抗血清白蛋白的抗体进行杂交实验。
【答案】引物 dNTP 防止Ti质粒发生自接 2 T-DNA 无色物质K 显微注射技术 动物病毒 蛋白质
【解析】
分析题图可知，①表示将目的基因导入植物受体细胞，常用方法有：农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；②表示将受体细胞培育成转基因植物，需要用到植物组织培养技术；③⑤表示转基因动物的培育过程，常以受精卵作为受体细胞，常采用显微注射法。
（1）在利用PCR技术获取目的基因的过程中，以从生物材料中提取的DNA作为模板，利用引物寻找HSA基因的位置并进行扩增，PCR的原料是脱氧核糖核苷三磷酸（即dNTP）。
（2）防止Ti质粒发生自接，构建表达载体的过程中，用碱性磷酸酶处理Ti质粒，但HSA基因不用碱性磷酸酶处理；由于在上述条件下，碱性磷酸酶除去了质粒核苷酸末端的5’磷酸，所以DNA连接酶可以使HSA基因和Ti质粒之间只能形成2个磷酸二酯键。
（3）过程①中需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在通过农杆菌的转化作用，让T-DNA进入植物细胞；由于报告基因表达的产物，能催化无色物质K呈现蓝色，所以除尽农杆菌后，还须转接到含无色物质K的培养基上筛选出转化的植物细胞。
（4）将目的基因导入动物细胞，采用最多、也是最为有效的方法是显微注射技术，还可以使用动物病毒作为载体，实现转化。
（5）为检测HSA 基因是否成功表达，可提取受体细胞的蛋白质，用抗血清白蛋白的抗体进行杂交实验。
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