题目内容
38.【生物—生物技术实践】（本题共15分）
某中学杨老师自制大蒜提取液，希望这种简便、经济的提取液能够高效的杀灭餐具上的细菌，杨老师完成了下面的探究实验：
（1）制作提取液：杨老师将大蒜榨汁后制成提取液，具体做法如下表所示。请根据表中数据，在表中的括号内填出1#提取液应加入的冷开水量：
| 大蒜提取液编号 | 1# | 2# |
| 大蒜（g） | 350 | 350 |
| 冷开水（mL） | （ ） | 880 |
| 无色食醋（mL） | / | 20 |
（2）使用方法：将餐具浸泡在提取液中10min后取出冲洗。
（3）样品抽取：将经过 处理的滤纸贴在餐具表面1min，然后再将滤纸放到50ml无菌水中，充分振荡后制成原液。再取1ml原液加入 ml无菌水中摇匀制成10倍稀释液。
（4）分离及培养：用 分离法分离细菌。分别取1ml原液和10倍稀释液，分别加到伊红-美蓝培养基中，用灭菌、消毒后的 （用具），将原液和稀释液均匀涂布到整个平板上。每个浓度各做三个培养皿，其目的是 。本实验另设1ml无菌水涂布在未接种的培养皿为空白对照，原因是排除 。最后在37℃培养48h。
（5）观察记录：在下面的空白处，设计1#提取液实验组的观察记录表：（2分）
（6）结果分析：统计数据，得到消毒前后的菌落总数变化（单位cfu/cm2，每平方厘米样品中含有的细菌群落总数）（每空2分）
| 总份数 | ＜1 | 1-10 | 10-102 | 102-103 | 103-104 | ＞104 | ||
| 1#提取液 | 消毒前 | 30 | 0 | 0 | 0 | 3 | 18 | 9 |
| 消毒后 | 30 | 14 | 12 | 4 | 0 | 0 | 0 | |
| 2#提取液 | 消毒前 | 33 | 2 | 0 | 0 | 3 | 12 | 16 |
| 消毒后 | 33 | 19 | 10 | 4 | 0 | 0 | 0 |
根据消毒前后的数据可知：
2#提取液效果高于1#，分析可能的原因： 。
请你给杨老师提出需要进一步研究的问题： 。
【答案】（1）900 （3）灭菌；9ml
（4）涂布分离（稀释涂布平板）（只写“涂布”不得分） 玻璃刮刀（三角刮刀、涂布器）；重复实验，减小实验误差；灭菌不彻底对本实验的影响
（5）(原液、稀释液1分；平均值1分) （2分）
| 菌 落 数 | ||||
| 1号培养皿 | 2号培养皿 | 3号培养皿 | 平均值 | |
| 原 液 | ||||
| 10-1稀释液 | ||||
（6）（每空2分）大蒜提取液能够高效杀菌；无色食醋促使大蒜提取液成微酸性，协同杀菌
（如：①进一步探究同等条件下，醋和蒜汁哪种消毒作用更好？②不同浓度的大蒜汁,哪种消毒效果更好？③醋作用的最适PH？）
【解析】1#与2#只有一个变量不同，即无色食醋，其余的量都应该是相同的。将滤纸无菌处理，可避免滤纸上所带细菌对实验结果的影响。要制成10倍稀释液，因此1ml原液加入9ml无菌水。分离细菌多用涂布分离(稀释涂布平板法)分离，用灭菌、消毒后的玻璃刮刀（三角刮刀、涂布器），将原液和稀释液均匀涂布到整个平板上，每个浓度多做几组实验以减少误差。本实验另设1ml无菌水涂布在未接种的培养皿为空白对照，以排除灭菌不彻底对本实验的影响。由图中数据可以看出大蒜提取液能够高效杀菌，而且有无色食醋的情况下，杀菌效果更好。本实验只探究了醋和蒜汁的有无对杀菌效果的影响，没有考虑浓度、PH值等的影响，这可以做为下一步的探究方向。
