题目内容
【题目】农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。请分析回答：
(1)微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心是_______。
(2) 在选育过程中，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一______的培养基上。通过比较单菌落周围__________的大小，可筛选出高效的目的菌。实验结果如右图显示的A～E五种菌株中，_______是最理想菌株。
(3) 若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_______。将lmL土壤溶液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度各在3个平板上分别接入0.lmL稀释液，经过适当培养后，6个平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5，空白对照组的平板上没有菌落，则每升土壤溶液中活菌数的理论值为_____________个。实际上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大，因为______________________。
(4) 科研人员用放射线处理该细菌，获得突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：
接种的菌种 | 一般培养基 | 实验处理及结果 |
A | 不生长 | 添加营养物质甲，能生长 |
B | 不生长 | 添加营养物质乙，能生长 |
A＋B | 能生长 | 不添加营养物质甲、乙，能生长 |
请分析突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因。___________________________________________。
【答案】 防止杂菌污染（无菌操作） 氮源 透明圈 E 稀释涂布平板法 5.8×106 统计结果是用菌落数来表示的，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 突变株A生长需要营养物质甲，突变株B可以提供；突变株B生长需要营养物质乙，突变株A可以提供
【解析】试题分析：本题综合考查学生对微生物的实验室培养、微生物的分离与鉴定等相关知识的识记和理解能力。解答本题需熟记并理解相应的基础知识并形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题意和图表中提取有效信息进行相关问题的解答。
(1) 微生物接种技术的核心是防止杂菌污染（无菌操作）。
(2) 已知该除草剂为含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明；降解该除草剂的细菌能分解培养基中的该除草剂，使培养基中出现透明圈。可见，在选育能降解该除草剂的细菌的过程中，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一氮源的培养基上。通过比较单菌落周围透明圈的大小，可筛选出高效的目的菌。实验结果图显示的A～E五种菌株中，E菌落周围的透明圈最大，因此E是最理想菌株。
(3) 对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用稀释涂布平板法进行接种。统计菌落数目时，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，因此应选择稀释度为10倍的、分别接入0.lmL稀释液的3个平板上菌落数（分别为59、57、58）进行统计，则每升土壤溶液中活菌数的理论值为[(59＋57＋58)÷3]×10 ÷(0.1×10-3)＝5.8×106个。由于统计结果是用菌落数来表示的，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以实际上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大。
(4)分析表中信息可知：突变株A生长需要营养物质甲，突变株B生长需要营养物质乙，据此可推知，突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是：突变株A生长需要营养物质甲，突变株B可以提供；突变株B生长需要营养物质乙，突变株A可以提供。
