题目内容
【题目】将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中,可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如下图所示(注:农杆菌中Ti质拉上只有T—DNA片段能转移到植物细胞中)。
(1)过程①需用同种____________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来,应使用____________培养基。
(2)过程⑤中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让____________进入棉花细胞;除尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是________________________。
(3)过程④中部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,原因是_______________________。
(4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是____________。种植转基因抗虫棉能减少__________的使用,以减轻环境污染。
【答案】限制性核酸内切 选择 T-DNA 筛选获得T-DNA片段的植物细胞 顶芽端合成的生长素向基部运输,促进根的分化 投放棉铃虫 农药
【解析】
分析图形可知本题是基因工程和植物组织培养相结合培养转基因植株的过程,基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。此过程要用相同的限制酶切割目的基因和质粒,使之有相同的黏性末端,这样才能连接。常用的导入受体植物细胞的方法是农杆菌转化法。
(1)为了使Bt基因的DNA和Ti质粒可以连接,一般用相同的限制酶切割二者出相同的黏性末端。筛选出农杆菌要用与标记基因对应的选择培养基。
(2)农杆菌转化法利用的是农杆菌的Ti质粒上有一段可转移的T-DNA,将目的基因插入到T-DNA中,使之进入植物细胞的染色体DNA上,从图中看出在Ti质粒上有卡那霉素抗性基因,因此可以用含卡那霉素的培养基上培养筛选获得T-DNA片段的植物细胞。
(3)芽自身可以合成生长素向下运输,促进根的分化。
(4)检验转基因棉的抗虫性状可以用个体生物学水平鉴定,即投放棉铃虫看棉铃虫的生存状态。种植转基因抗虫棉可以抵御棉铃虫的侵害,减少农药的使用,从而减轻环境污染。