题目内容
【题目】Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子I(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入______________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出_______________反应最强的培养孔所对应的小鼠M.
(2)实验所用骨髓瘤细胞需置于______________的气体环境中进行培养,融合前将部分培养细胞置于选择培养基中培养,一段时间后培养基中_______________填(“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。
(3)从小鼠M的脾脏中取相应细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有______________能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养、检测,筛选出符合要求的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中进行克隆培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体,其与常规的血清抗体相比,优越性体现在______________。
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计__________。
对照组(A) | 131I治疗组(B) | 单克隆抗体治疗组(C) |
给GD模型小鼠腹腔注射0.1 ml无菌生理盐水 | 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 ml无菌生理盐水131I | ___________________________ |
【答案】ICAM-1 阳性(或“抗原一抗体”) 95%空气+5% CO2 无 无限增殖(或既能无限增殖又能产生抗体) 特异性强、灵敏度高、可大量制备 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM-1单克隆抗体
【解析】
1、单克隆抗体:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体.具有特异性强、灵敏度高,并可能大量制备的特点。
2、单克隆抗体的制备过程:首先用特定抗原注射小鼠体内,使其发生免疫,小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,单克隆抗体制备过程中的两次筛选:第一次筛选:利用特定选择培养基筛选,获得杂交瘤细胞,即AB型细胞(A为B淋巴细胞,B为骨髓瘤细胞),不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选:利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选,获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入ICAM-1以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出阳性(或“抗原-抗体”)反应最强的培养孔所对应的小鼠M。
(2)实验用骨髓瘤细胞置于95%空气+5%CO2恒温培养箱中37℃培养,融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中无骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。
(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有无限增殖能力的细胞。与常规的血清抗体相比,单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。
(4)根据题干中实验目的“比较实验用抗体和1311对GD模型小鼠的治疗作用”,单克隆抗体治疗组(C)中应给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的抗ICAM-1单克隆抗体。
【题目】人感染乳头瘤病毒(HPV)可诱发宫颈癌等恶性肿瘤。研究机构为评估某种HPV疫苗的效果,在志愿者中进行接种。一段时间后,统计宫颈出现癌前病变(癌变前病理变化,可发展为恶性肿瘤)的人数,结果见表。
组别 | 接种物 | 总人数 | 癌前病变人数 | |
A (接种前未检出HPV DNA) | A1 | 对照剂 | 7 863 | 83 |
A2 | 疫苗 | 7 848 | 4 | |
B (接种前检出HPV DNA) | B1 | 对照剂 | 1 125 | 126 |
B2 | 疫苗 | 1 121 | 125 |
(1)为制备该疫苗,将HPV外壳蛋白L1基因与________连接,导入受体细胞。受体细胞将目的基因转录,再以________为原料翻译出L1蛋白。这样就获得了疫苗的有效成分。
(2)人体接种该疫苗后,________作为抗原刺激机体产生特异性抗体。一旦HPV侵入机体,________会迅速增殖、分化,产生大量抗体。这些抗体与游离HPV结合,阻止HPV________。所以A2组出现癌前病变的比例明显低于对照组。
(3)B1组人群中出现癌前病变的比例显著高于________组,据此推测感染HPV是诱发癌前病变的因素之一。
(4)B2组与B1组人群中出现癌前病变的比例没有明显差异,原因可能是该疫苗未能明显诱导________清除体内HPV。
(5)综上所述,该疫苗可用于宫颈癌的________。