题目内容
【题目】下列有关酶的叙述,正确的是
A. 酶分子是在基因的指导下、在核糖体上合成的
B. 一种酶催化化学反应的种类与其空间结构有关
C. 经高温处理的酶,加入双缩脲试剂后不会出现紫色
D. 酶与无机催化剂都通过提高化学反应的活化能来起催化作用
【答案】B
【解析】
试题大多数酶的化学本质是蛋白质,再基因的指导下,在核糖体合成,A错误;酶的催化作用具有专一性,一种酶催化化学反应的种类与其空间结构有关,B正确;经高温处理的酶,空间结构发生了改变,没有破坏肽键的结构,所以加入双缩脲试剂后仍然会出现紫色,C错误;酶通过降低化学反应的活化能来起催化作用,D错误。
【题目】黑胸大蠊是一种生活在我国南方地区的主要卫生害虫,通过生物防治手段可以起到一定抑制虫害的作用。某研究小组对黑胸大蠊浓核病毒的PfDNV基因与pUCl19质粒进行重组构建,通过感染黑胸大蠊研究其病理特征,已知KpnⅠ、PstⅠ、HindⅢ3种限制酶的酶切位点不同,Amp为氨苄青霉素抗性基因,实验过程图解如下。请分析回答下列问题:
(1)纯化后的PfDNV基因可通过___________技术扩增。常将PfDNV基因与pUC119 质粒采取加G—C尾的连接方式构建重组质粒,该加尾的连接方式能使重组质粒的热稳定性___________。
(2)研究小组将获得的重组质粒通过___________法转染大肠杆菌,在含有___________的培养基上培养一段时间后,挑选出部分菌株,用HindⅢ酶解菌株中的重组质粒,经电泳分析后发现有些菌株显示有5kb和3.7kb片段,还有些菌株显示有1.8kb和6.9kb片段,出现这种情况的原因是______________________。
(3)选择可以正常表达的重组质粒PfDNV-pUCl19,利用KpnⅠ酶酶解后回收7.3kb的片段,通过_______的作用获得PfΔKpn-pUC119重组质粒,将两种重组质粒通过腹部注射法注入黑胸大蠊幼虫体内,所得的结果如下表所示。
质粒转染黑胸大蠊实验结果
接种物 | 接种虫数 | 感染虫数 | 感染百分数(%) |
PfΔKpn-pUC119 | |||
(2500ng) | 20 | 20 | 100 |
(1250ng) | 20 | 1S | 90 |
(250ng) | 20 | 17 | 85 |
PfAKpn-pUC119 | |||
(2300ng) | 20 | 0 | 0 |
(1000ng) | 20 | 0 | 0 |
野生型病毒 | 20 | 20 | 100 |
未接种 | 20 | 0 | 0 |
从上表中可以看出,当注射的重组质粒PfDNV-pUCl19的量在___________ng及以上时,虫体最终死亡率与野生型病毒感染的结果—致。PfΔKpn-pUC119重组质粒注射幼虫后没有感染的根本原因是:KpnⅠ酶酶解后再连接,导致______________________。