Question

【题目】为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是( )

A. 检测C基因是否整合到菊花染色体上用抗原—抗体杂交方法

B. 用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞

C. 在培养基中添加潮霉素，筛选被转化的菊花细胞

D. 用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒

Answer 1

【答案】A

【解析】

1、基因工程的基本工具：分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）、“分子缝合针”--DNA连接酶、“分子运输车”--载体。
2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。
3、标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素抗性基因。
4、目的基因的检测和表达：
（1）首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。
（2）其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。
（3）最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的 抗体进行抗原-抗体杂交。
（4）有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。

根据分析可知，检测C基因是否整合到菊花染色体上可用DNA分子杂交技术，A错误；将目的基因导入到植物细胞，常用农杆菌转化法，可以将目的基因C导入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA段，之后再用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞染色体上的DNA上，B正确；标记基因常用来检测目的基因是否导入受体细胞，图2中显示标记基因是潮霉素抗性基因，可在培养基中添加潮霉素，筛选被转化的菊花细胞，C正确；据图分析可知，在目的基因的两端、启动子和终止子之间都有限制性核酸内切酶EcoRⅠ的切割位点，因此可以用限制性核酸内切酶EcoRⅠ切割目的基因和运载体，之后再用DNA连接酶连接形成基因表达载体，D正确。

故选A。