题目内容
【题目】乳酸菌等微生物与我们生活息息相关。请回答下列相关问题。
（1）若要纯化培养乳酸菌，在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，一般还要加入琼脂，它是一种从红藻中提取的多糖，加入琼脂作为_______。在制作此培养基时还要满足微生物对特殊营养物质的需求，例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加_______，制备培养基的操作顺序是：计算→称量→_______→倒平板，培养基中的(NH4)2CO3是否能为乳酸菌提供碳源并说明原因___________________________。
（2）纯化微生物时，可采用___________________两种最常用的方法进行接种。为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙，推测其原因是______________________________________。有些鉴别培养基可在培养基中加入指示剂，例如分解尿素的细菌在添加_____指示剂的培养基上会显示出特定的颜色；在鉴定大肠杆菌时在培养基中加入_______。制作泡菜时，要检测亚硝酸盐的含量，其原理为在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_____反应，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成______色染料。纯化后的菌可在-20℃长期保存时，应采用______的方法对菌种进行长期保藏。
（3）若甲同学选取一定体积的乳酸菌菌液，进行梯度稀释，若将103倍的稀释样液接种在固体培养基上培养一段时间后，统计三个平板上菌落数分别是200、180、220。如果需要据此计算出乳酸菌的密度，还需要知道的一个重要数据是_______。另一同学乙涂布了4个平板，数值为177,193,185；其中一个空白对照平板出现了12个菌落，乙同学将173（185-12）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法是否正确，并说明你的原因。___________________________________________。
【答案】凝固剂 维生素 溶化→灭菌 不能，乳酸菌为异养生物只能利用含碳有机物 平板划线法或稀释涂布平板法 乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈 酚红 伊红-美蓝 重氮化 玫瑰红 甘油管藏 接种时所用样液的体积 不正确，空白培养基上出现菌落说明被污染需重新制作培养并计数
【解析】
1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。
2、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
（1）在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，一般还要加入琼脂，其目的是作为凝固剂；乳酸杆菌的培养基中需要加入维生素；制备培养基的操作顺序是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板；异养生物只能利用含碳有机物，因此(NH4)2CO3是不能为乳酸菌提供碳源。
（2）微生物常见的接种的方法有①平板划线法、②稀释涂布平板法；乳酸呈酸性，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈，故在配制培养基时加入碳酸钙就能鉴别乳酸菌菌落；分解尿素的细菌在添加酚红的指示剂的培养基上会显示出特定的颜色；在鉴定大肠杆菌时在培养基中加入伊红-美蓝，呈现黑色菌落的即为大肠杆菌；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。纯化后的菌可在-20℃长期保存时，应采用甘油管藏的方法对菌种进行长期保藏。
（3）统计出平板上的菌落数量后还需知道接种时所用样液的体积，两者相除才能求出密度；乙同学一个空白对照平板出现了12个菌落，空白培养基上出现菌落说明被污染需重新制作培养并计数，用来计数是不正确的。
【题目】为研究pH值对人体某种消化酶活性的影响，现准备了5支各含有 5mL酶溶液但pH值各不相同的试管，每支试管中加入1块1cm3的正方体凝固蛋白质，并置于25℃室温条件下。各试管内蛋白质块消失的时间如下表：
酶溶液的pH值 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
蛋白质块消失的时间（min） | 13 | 9 | 11 | 45 | 60 |
请分析回答下列问题：
（1）本实验的自变量为_____，实验涉及该酶的最适pH值为_____。
（2）为确认蛋白块的消失确实是由于酶的作用，实验中还应设计对照组。对照组设计思路是：_____。
（3）本实验还可以通过观察_____来判断酶活性的强弱。
（4）要使本实验在更短时间内完成，可以改进的方法是_____。
【题目】为了探究温度、pH对酶活性的影响，下列实验设计合理的是
试验编号 | 探究课题 | 选用材料与试剂 |
① | 温度对酶活性的影响 | 过氧化氢溶液 新鲜的肝脏研磨液 |
② | 温度对酶活性的影响 | 新制的淀粉酶溶液 可溶性淀粉溶液 碘液 |
③ | pH对酶活性的影响 | 新制的蔗糖溶液 可溶性淀粉溶液 碘液 |
④ | pH对酶活性的影响 | 新制的淀粉酶溶液 可溶性淀粉溶液 斐林试剂 |
A.实验①B.实验②
C.实验③D.实验④