Question

【题目】【生物——选修3：现代生物科技专题】

下图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：

（1）构建表达载体需要的酶是：__________ ，表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、_______、___________、终止子和复制原点等；构建表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中_______，并可遗传给下代。

（2）提取Gfp基因时常用到PCR技术，PCR扩增目的基因时，首先要根据______合成引物；需要加入两种引物，原因是_______，用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增。

Answer 1

【答案】 限制性核酸内切酶、DNA连接酶 标记基因 启动子 稳定存在，表达和发挥作用 目的基因的核苷酸序列 DNA聚合酶只能从3＇端延伸DNA链

【解析】试题分析：本题考查基因工程，考查对基因工程工具、PCR扩增目基因、基因表达载体构建的理解和识记。

（1）构建表达载体需要用限制性核酸内切酶切割供体DNA和质粒，并用DNA连接酶连接粘性末端，表达载体应包含目的基因绿色荧光蛋白基因Gfp、标记基因、启动子、终止子和复制原点等；构建表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在、表达和发挥作用，并可遗传给下代。

（2）PCR扩增目的基因时，首先要根据目的基因的核苷酸序列合成引物；由于DNA聚合酶只能从3＇端延伸DNA链，因此需要加入两种引物，才能确保DNA两条链同时被扩增。