题目内容
【题目】下面是用两种不同的方法制备单克隆抗体的流程图。回答下列问题：
(1)甲图中从产生免疫反应的小鼠体内得到了抗_____的抗体,说明小鼠体内已形成了相应的B淋巴细胞。设法将B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合,常用的诱导因素有聚乙二醇、_______、电激等。
(2)甲图中经选择性培养的①______细胞,还需进行克隆化培养和_____检测，经多次筛选,就可获得足够数量的②细胞。
(3)乙图中构建基因表达载体的目的是使______在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传治下一代。将重组DNA导入烟草细胞采用最多的方法是______。
(4)乙图中将烟草细胞培养成转基因烟草植株涉及的最基本技术是______，这项技术依据的原理是_______。
【答案】 埃博拉病毒 灭活的病毒 杂交瘤 抗体 目的基因 农杆菌转化法 植物组织培养 植物细胞的全能性
【解析】单克隆抗体的制备时动物细胞融合技术的应用之一，此过程中需要先注射抗原，使生物体产生具有免疫能力的B淋巴细胞，再将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，并筛选出能产生特异性抗体和大量增殖的杂交瘤细胞，最后经过体内和体外培养获取单克隆抗体．单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的优点。单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．两次抗体检测：专一抗体检验阳性。
（1）小鼠注入埃博拉病毒属抗原，经体液免疫产生抗埃博拉病毒的抗体，诱导动物细胞隔合的方法有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。（2）经选择培养基选择作用只有杂交瘤细胞能存活，但是杂交瘤细胞有多种，产生的抗体种类也不同，还要通过抗体检测选出能产生抗埃博拉病毒的抗体的杂交瘤细胞。（3）运载体能在受体细胞中存活、增殖，所以目的基因与运载体结合后，也能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传治下一代，将基因表达载体导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。（4）将烟草细胞培养成转基因烟草植株的技术是植物组织培养，组织培养的原理是植物细胞的全能性。
项目 | 第一次筛选 | 第二次筛选 |
筛选原因 | 诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞 | 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞 |
筛选方法 | 用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长 | 用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群 |
筛选目的 | 得到杂交瘤细胞 | 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 |
