题目内容
【题目】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:
(1)从______________中可获取不具有启动子的htPA基因,再通过________技术使其数量大量增加。
(2)过程①需将 htPA基因与载体用________________切割后,再通过________________连接,来构建____________________。
(3)过程②常用______________技术将目的基因导入受体细胞中,受体细胞通常采用____________。
(4)为了在羊乳中获取目的基因表达产物,还需要在目的基因的首端加上特殊的调控组件:_______________________。欲知羊乳中是否含有人组织纤溶酶原激活物,需使用_______________对其进行检验。
【答案】cDNA文库(部分基因文库) PCR 同种限制酶 DNA连接酶 基因表达载体 显微注射 受精卵 乳腺蛋白基因的启动子 相应抗体
【解析】
据图分析,①表示基因表达载体的构建,②表示将目的基因导入受体细胞,③表示早期胚胎培养,④表示胚胎移植,⑤表示妊娠分娩获得转基因母羊,⑥表示从分泌的羊乳中获取htPA。
(1)从cDNA文库中获得的目的基因(htPA)是经过反转录获得的,母羊启动子;利用PCR技术可以获得大量的htPA基因。
(2)过程①表示基因表达载体的构建,先用同一种限制酶切割htPA基因与载体,在利用DNA连接酶将两者连接起来构成基因表达载体。
(3)②表示将目的基因导入受体细胞(动物细胞),常用的受体细胞是受精卵,常用的方法是显微注射法。
(4)根据题意分析,为了在羊乳中获取目的基因表达产物,应该将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子组合在一起;检测目的基因的产物一般用抗原-抗体杂交技术,因此欲知羊乳中是否含有人组织纤溶酶原激活物,需使用相应抗体对其进行检验。