题目内容
下列有关基因工程的说法正确的是
A．DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端形成氢键
B．用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞膜的通透性
C．限制性核酸内切酶能切断DNA中磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键
D．用质粒中的抗生素抗性基因可以筛选出含有重组DNA的植物细胞
C
【解析】
试题分析：DNA连接酶作用的是磷酸二酯键，故A错误。用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞壁的通透性，故B错误。核酸内切酶作用的是磷酸二酯键，故C正确。用质粒中的抗生素抗性基因可以筛选出含有重组DNA质粒的细胞，故D错误。
考点：本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。
的农田种植了转基因作物。
，则限制酶HindⅢ的识别序列是________。回答下列有关基因工程和克隆技术的问题。（10分）
2006年12月22日，我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：
63、说出绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中用到了哪些生物工程技术？
利用了哪些原理？ （本题答案从下列所给选项中选择填写）
①转基因技术；②细胞核移植技术；③胚胎移植技术；④干细胞技术；⑤动物细胞培养技术
⑥基因突变；⑦基因重组；⑧动物细胞核具有全能性；⑨动物细胞具有全能性
64、过程①②中必需用到的酶分别是 和 。绿色荧光蛋白基因之所以能与质粒重组，原因是 。
65、早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。
通过上图中过程①的方法获取目的基因的数量是有限的，要获得大量的绿色荧光蛋白基因可以利用PCR技术。PCR扩增反应（如下图所示）中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸点的条件下，发挥延伸DNA子链的作用，将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。请回答：
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PCR（DNA聚合酶链式反应）技术示意图：
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66、你认为TaqDNA聚合酶一定是从下列哪种生物体细胞中分离提取的？
A．水母细胞 B．猪胎儿成纤维细胞 C．极端嗜热菌 D．大肠杆菌
67、下面的表达式不能反映TaqDNA聚合酶的功能，为什么？ 。
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68、用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点和标出碱基对数。（2分）