Question

【题目】对硝基苯酚（PNP）（分子式为C6H5N03）颜色为黄色，若被分解则颜色消失，属于硝基苯酚类有机化合物的一种，主要来源于农药、医药、染料、塑料等生产企业排放，并广泛分布于环境 中，对植物、微生物和动物均有毒性。某生物兴趣小组提出从污水厂曝气池长期驯化的污泥中 分离出对硝基苯酚降解菌并研究其降解特性。回答下列问题：

（1）分离对硝基苯酚降解菌常用________________培养基进行筛选，此培养基成分应如何设置才能达到分离的目的？_________。

（2）制备培养基的过程包括：计算→称重→溶化→灭菌→________，常用________方 法对培养基进行灭菌。

（3）利用________（方法）分离纯化得到单一的对硝基苯酚降解菌菌落，可以将在菌落周围是否产生________作为筛选标记。

（4）分离纯化所得菌种如需长期保存可采用________的方法。

Answer 1

【答案】选择??? 以PNP为唯一的碳源或氮源??? 倒平板??? 高压蒸汽灭菌??? 稀释涂布平板法或平板划线法??? 透明圈??? 甘油管藏???

【解析】

本实验目的是分离分解对硝基苯酚的细菌，因此应当配制以对硝基苯酚为唯一氮源和碳源的培养基；微生物的培养过程中，常用来分离微生物的方法是稀释涂布平板法和平板划线分离法；进行平板划线操作时，从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连；稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于（稀释液中的）一个活菌，由于菌落可能是由两个或多个细胞形成，所以统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数。

（1）为了筛选污泥中可分解对硝基苯酚的细菌，常用选择培养基进行筛选，此培养基成分应以PNP为唯一的碳源或氮源即可分离。

（2）制备培养基的过程包括：计算→称重→溶化→灭菌→倒平板，培养基常用高压蒸汽灭菌。

（3）常用来分离微生物的方法是稀释涂布平板法和平板划线分离法，对硝基苯酚降解菌能分解对硝基苯酚，故将在菌落周围出现透明圈。

（4）分离纯化所得菌种如需长期保存可采用甘油管的方法。