题目内容
【题目】Bt基因即苏云金芽胞杆菌基因，因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的转杀虫基因。下图为培育转Bt基因抗虫棉幼苗的基本操作过程，请分析回答：
（1）Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取，也可以从其cDNA文库中获取。从前者获取的Bt基因______(含有/不含有)启动子。
（2）若利用PCR技术从cDNA文库中获取Bt基因（基因序列未知），需根据Bt蛋白氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，原因是__________________。在PCR体系中需加入其中的_________(全部/任意1种/其中2种)引物。若Bt基因序列已知，则引物的序列通常为__________种。
（3）在构建基因表达载体的过程中，为了方便筛选含有目的基因的细胞，作为运载体的Ti质粒应含有____________，Ti质粒中能帮助目的基因整合到宿主细胞染色体上的序列称为__________，图中将目的基因导入受体细胞的方法称为____________。
（4）长期大面积种植转Bt基因抗虫棉可能对环境造成影响，请就某一种间关系指出转Bt基因抗虫棉可能对环境造成的不利影响（要求说出某一种间关系的名称并相应说出可能造成的不利影响）。_________________________________。
【答案】 含有 一种氨基酸可能有多种密码子，对应生物DNA碱基序列就会有多种 全部 2 标记基因 T-DNA（可转移DNA） 农杆菌转化法 捕食，造成棉铃虫绝种，使棉铃虫的天敌种群数量大大减少寄生，使棉铃虫的寄生性天敌种群数量大大减少；竞争，造成被毒杀的棉铃虫等以外的其他害虫的泛滥等
【解析】试题分析：本题综合考查学生对基因工程的知识的识记和理解能力。解答本题需熟记并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题图和题意中提取有效信息，进行相关问题的解答。
(1) Bt基因是目的基因。提取目的基因时，可以从构建的Bt基因组文库中获得，因基因组文库包含了一种生物的全部基因，所以通过此途径获得的基因含有启动子。
(2)利用PCR技术扩增目的基因时，引物通过碱基互补配对与DNA单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下延伸。根据Bt蛋白氨基酸序列设计引物，首先要依据基因的表达过程推知基因的碱基序列。由于一种氨基酸可能有多种密码子，因此所推知的对应生物DNA碱基序列就会有多种。可见，根据Bt蛋白氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，在PCR体系中需加入其中的全部引物。若Bt基因序列已知，则引物的序列通常为2种。
(3)在构建基因表达载体的过程中，为了方便筛选含有目的基因的细胞，作为运载体的Ti质粒应含有标记基因。Ti质粒中能帮助目的基因整合到宿主细胞染色体上的序列称为T-DNA（可转移DNA）。图中将目的基因导入幼苗受体细胞时采用的是农杆菌转化法。
(4)长期大面积种植转Bt基因抗虫棉可能对环境造成影响，从种间关系的角度分析可能有：①捕食，造成棉铃虫绝种，使棉铃虫的天敌种群数量大大减少；②寄生，使棉铃虫的寄生性天敌种群数量大大减少；③竞争，造成被毒杀的棉铃虫等以外的其他害虫的泛滥等。
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