题目内容

【题目】下表为常用的限制酶及其识别序列和切割位点,据表分析以下说法正确的是(  )

限制酶

BamH

EcoR

Hind

Kpn

Sau3A

Sma

识别序列和

切割位点

G↓GATCC

G↓AATTC

GTY↓RAC

GGTAC↓C

↓GATC

CCC↓GGG

(注:Y表示CTR表示AG

A.一种限制酶只能识别一种脱氧核苷酸序列

B.限制酶的切点一定位于识别序列的内部

C.不同限制酶切割后一定形成不同的黏性末端

D.限制酶切割后不一定形成黏性末端

【答案】D

【解析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。限制酶切割后能形成两种末端,即黏性末端和平末端。

A、由于Y表示CTR表示AG,说明一种限制性核酸内切酶能识别一种或多种特定的脱氧核苷酸序列,A错误;
B、限制酶的切割位点不一定在识别序列的内部,如Sau3AB错误;
C、不同限制酶切割后形成的黏性末端不一定相同,如EcoRⅠ、HindⅡ、KPnⅠ、SmaⅠ切割后形成的黏性末端各不相同,而BamHⅠ和Sau3AⅠ切割后形成的黏性末端相同,C错误;
D、限制酶切割后不一定都形成黏性末端,也有平末端,如HindⅡ、SmaⅠ,D正确。
故选D

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3)实验过程:

①酵母菌悬液的制备:无菌条件下将酵母菌接种至液体培养基中培养约12h,离心后获得酵母菌,用灭菌的生理盐水稀释成适宜的浓度,酵母菌的数量可采用____________计数法进行直接计数。

②固定化酵母细胞的制备:称取海藻酸钠,加入无菌水,____________溶解,配制成一定浓度的海藻酸钠溶液。待溶液____________,向其中加入酵母菌,充分搅拌使其混合均匀;无菌条件下用注射器将上述混合好的溶液缓慢滴入相应温度和浓度的____________溶液中,恒温维持1h,使酵母菌充分固定化。

4)研究发现,海藻酸钠浓度为3%时,固定化酵母发酵液的残糖量最低,当海藻酸钠浓度低于3%时,固定化酵母颗粒的空间网状结构大,导致____________,影响后继的发酵过程。

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