题目内容
【题目】人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
（1）htPA基因与载体用_________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_________技术。
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要经过__________，才具备受精能力。
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得８多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的__________。
（4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到__________，说明目的基因成功表达。
【答案】（1）同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶） DNA分子杂交（或核酸探针）
（2）超数排卵；获能（处理）
（3）显微注射法 性别鉴定；全能性
（4）htPA（或人组织纤溶酶原激活物）
【解析】
试题分析：（1）在基因工程中，构建基因表达载体时，把目的基因与运载体一般用同种限制酶进行切割，再用DNA连接酶连接，以构建基因表达载体；检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术。
（2）超数排卵处理时，需要注射促性腺激素；采集的精子必须经过获能处理后才具备受精能力。
（3）将重组DNA分子导入动物细胞的方法是显微注射法；为了获得母羊，胚胎移植前需要对胚胎进行性别鉴定；利用胚胎分割和胚胎移植技术可以获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性。
（4）目的基因基因成功表达的标志是htPA基因（目的基因）在母羊的羊乳细胞中转录翻译出相应的蛋白质（人组织纤溶酶原激活物）。
