Question

【题目】家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。科学家将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药。回答下列相关问题：

（1）进行转基因操作前，需将获得的幼蚕组织先剪碎，并用_____酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞作为受体细胞。

（2）在培养获得单个细胞时，为避免杂菌污染，除进行一系列无菌处理外，还应在培养液中添加一定量的_______________。培养家蚕细胞时，细胞会产生贴壁生长和_______现象，通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以________________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

（3）将干扰素基因导入培养的家蚕细胞时，需要载体协助，而载体一般不选择_______（填“噬菌体”或“昆虫病毒”），原因是_____________________________________________。

（4）若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，采用的技术有__________和___________________。

Answer 1

【答案】胰蛋白酶 抗生素 接触抑制 增大细胞贴壁生长的附着面积 噬菌体 噬菌体的宿主细胞是细菌而不是家蚕 分子杂交技术 抗原—抗体杂交技术

【解析】

1、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。

（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。

（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。

2、细胞的接触抑制：细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖。

（1）要将动物组织细胞分散开需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）酶短时处理动物组织。

（2）在培养动物细胞时，为避免杂菌污染，除进行一系列无菌处理外，还应在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴满瓶壁的细胞会产生接触抑制现象。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积，从而增加培养的细胞数量，也有利于气体交换。

（3）若将干扰素基因导入培养的家蚕细胞时，需要载体协助，而载体一般不选择噬菌体，原因是噬菌体的宿主细胞是细菌而不是家蚕。

（4）基因的表达过程包括转录和翻译，因此若要检测某基因是否表达，可检测表达过程中的产物mRNA和蛋白质。因此，若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，采用的技术有分子杂交技术和抗原—抗体杂交技术。