在药品生产中,人们逐步利用基因工程技术生产出如干扰素,白细胞介素,凝血因子等各种高质量低成本的药品,请分析回答:

(1)在用目的基因与质粒形成重组DNA过程中,一般要用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶,其中限制酶切割的是___________________键,其特点是___________________________。

(2)将含有“某激素基因”的质粒导入细菌细胞后,能在细菌细胞内直接合成“某激素”,则该激素在细菌体内的合成包括______________________和_________________两个阶段。

(3)基因工程形成工程菌的遗传学原理是______________________________。

(4) 基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定,其中分子水平的检测又分三步:首先要检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因,采用技术是______________________;其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是____________________________;最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是__________________________________________。

(5)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过某种技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对)

第一步水解

产物(单位bp)

第二步水解

产物(单位bp)

A酶切割

1900

将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割

1700 200

1500

800 700

1600

1100 500

由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。

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