题目内容
某质粒和含抗盐基因的DNA片段上均有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制性核酸内切酶酶切位点，同时质粒上还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因（如下图）。下列相关叙述错误的是
| A．SalⅠ酶切后可产生质粒-质粒、质粒-抗盐基因和抗盐基因-抗盐基因三种两两连接产物 |
| B．用SalⅠ和HindⅢ两种限制性核酸内切酶切可保证质粒与抗盐基因的定向连接 |
| C．用BamHⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶切得不到含目的基因的重组质粒 |
| D．在同时添加氨苄青霉素和四环素的培养基中可筛选得到含重组质粒的受体细胞 |
D
解析A选项用一种限制酶SalⅠ酶切割所产生切口相同，故可产生三种连接产物；B选项的两种限制酶识别序列不同，切口不同，故能保证质粒与抗盐基因的定向连接；C选项BamHⅠ限制酶把目的基因抗盐基因切割，结构破坏，故得不到含目的基因的重组质粒；用上述限制酶切割质粒，其上的抗四环素基因被切割，结构被破坏，故在添加四环素的培养基中不能筛选得到含重组质粒的受体细胞，故D错。
（12分）普通烟草转入抗盐基因培育抗盐烟草的过程如下图所示。已知含抗盐基因的DNA和质粒上均有salⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶切位点，质粒上另有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答问题：
1.构建重组质粒时，应选用限制酶____________对____________进行切割，以保证它们定向连接。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的键，具体说就是____________和____________之间的键。
2.如果目的基因直接注入烟草细胞，一般会被烟草细胞____________。质粒的作用是____________。
3.切割后的目的基因与质粒由____________酶连接成重组质粒。筛选导入重组质粒的细菌，应在其培养基中加入___________，理由是__________________。
4.烟草细胞经_______________形成愈伤组织。某研究性学习小组以愈伤组织为材料进行了下列实验：一组在培养基中加30%的蔗糖，另一组不加蔗糖，接种后，每组再分成两个小组，分别在光下和黑暗中培养。1个月后，观察其生长、分化情况，结果见下表：
| 培养条件 | 加蔗糖 | 不加蔗糖 |
| 光照 | 正常生长，分化 | 不生长，死亡 |
| 黑暗 | 只生长，不分化 | 不生长，死亡 |
5.从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功的方法是___________________。
（12分）普通烟草转入抗盐基因培育抗盐烟草的过程如下图所示。已知含抗盐基因的DNA和质粒上均有salⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶切位点，质粒上另有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答问题：
1.构建重组质粒时，应选用限制酶____________对____________进行切割，以保证它们定向连接。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的键，具体说就是____________和____________之间的键。
2.如果目的基因直接注入烟草细胞，一般会被烟草细胞____________。质粒的作用是____________。
3.切割后的目的基因与质粒由____________酶连接成重组质粒。筛选导入重组质粒的细菌，应在其培养基中加入___________，理由是__________________。
4.烟草细胞经_______________形成愈伤组织。某研究性学习小组以愈伤组织为材料进行了下列实验：一组在培养基中加30%的蔗糖，另一组不加蔗糖，接种后，每组再分成两个小组，分别在光下和黑暗中培养。1个月后，观察其生长、分化情况，结果见下表：
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培养条件 |
加蔗糖 |
不加蔗糖 |
|
光照 |
正常生长，分化 |
不生长，死亡 |
|
黑暗 |
只生长，不分化 |
不生长，死亡 |
你能得出什么结论？______________________________________。
5.从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功的方法是___________________。
