Question

（12分）普通烟草转入抗盐基因培育抗盐烟草的过程如下图所示。已知含抗盐基因的DNA和质粒上均有salⅠ、HindⅢ、BamHⅠ酶切位点，质粒上另有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答问题：

1.构建重组质粒时，应选用限制酶____________对____________进行切割，以保证它们定向连接。限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的键，具体说就是____________和____________之间的键。
2.如果目的基因直接注入烟草细胞，一般会被烟草细胞____________。质粒的作用是____________。
3.切割后的目的基因与质粒由____________酶连接成重组质粒。筛选导入重组质粒的细菌，应在其培养基中加入___________，理由是__________________。
4.烟草细胞经_______________形成愈伤组织。某研究性学习小组以愈伤组织为材料进行了下列实验：一组在培养基中加30%的蔗糖，另一组不加蔗糖，接种后，每组再分成两个小组，分别在光下和黑暗中培养。1个月后，观察其生长、分化情况，结果见下表：

培养条件	加蔗糖	不加蔗糖
光照	正常生长，分化	不生长，死亡
黑暗	只生长，不分化	不生长，死亡

你能得出什么结论？______________________________________。
5.从个体水平鉴定抗盐转基因烟草是否培育成功的方法是___________________。

Answer 1

1.salⅠ、HindⅢ酶   含抗盐基因的DNA和质粒进行切割   
脱氧核糖   磷酸   
2.核酸酶分解   运载体   
3.DNA连接 不同培养基中分别加入氨苄青霉素、四环素     添加青霉素的培养基中成活，四环素中不成活的为重组质粒。因为重组质粒带有抗氨苄青霉素基因，而四环素基因被破坏   
4.脱分化    细胞生长需要蔗糖，细胞分化需要光照。   
5.用一定浓度盐水浇灌或移栽到盐碱地中

解析