题目内容
【题目】尿素是一种重要的氮肥，农作物不能将其直接吸收利用，而是通过土壤中的细菌将其分解为氮和CO2后才能被农作物利用。请回答下列问题：
（1）土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成____________。
（2）为筛选尿素分解而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外还包括水、碳源____________等，该培养基能筛选出目的菌株的原因是________________________。
（3）一般依据尿素分解菌菌落的____________、隆起程度和颜色等特征来统计菌落数目。现将10mL尿素分解菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为106的样液接种到3个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为39、42、45，则1mL悬液中活细菌数量为____________个。上述过程采用的接种方法是________________________。
（4）为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可采取的措施是________________________。
【答案】 脲酶 无机盐 只有以尿素作为唯一氮源的细菌才能在该培养基上生长 形态、大小 4.2×108 稀释涂布平板法 单独设置一个灭菌后不接种样液的培养皿（含培养基）进行培养
【解析】本题考查分解尿素的微生物的培养与计数，要求考生理解脲酶的作用，能配制合适的培养基培养细菌并进行计数。
（1）脲酶能催化尿素分解为氨气和二氧化碳，土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成脲酶。
（2）为筛选尿素分解而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外还包括水、碳源、无机盐等，该培养基能筛选出目的菌株的原因是只有以尿素作为唯一氮源的细菌才能在该培养基上生长。
（3）一般依据尿素分解菌菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征来统计菌落数目。现将10mL尿素分解菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为106的样液接种到3个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为39、42、45，则1mL悬液中活细菌数量为（39+42+45）
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0.1×106=4.2×108个；上述过程采用的接种方法是稀释涂布平板法。
（4）为检验培养基及培养皿灭菌是否合格，可单独设置一个灭菌后不接种样液的培养皿（含培养基）进行培养，若该培养皿中没有出现菌落，则说明该培养基及培养皿灭菌合格。
【点睛】易错知识点拨:
1)土壤中分解尿素的细菌筛选原理
①选择培养基的成分：尿素作为唯一的氮源
②鉴定方法：在培养基中加入酚红指示剂，若pH升高，指示剂变红，说明细菌能分解尿素
2）微生物数量统计方法：
(1)直接计数法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板)
(2)间接计数法：稀释涂布平板法
3）两种纯化细菌的方法的比较：
项目 | 优点 | 缺点 | 适用范围 |
平板划线法 | 可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 | 不能计数 | 适用于好氧菌 |
稀释涂布平板法 | 可以计数，可以观察菌落特征 | 吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延 | 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 |
【题型】非选择题
【结束】
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【题目】干扰素是动物或人体细胞受到病毒感染后产生的一种糖蛋白，具有抗病毒、抑制细胞增殖及抗肿瘤的作用。 培育转干扰素基因马铃薯植株的大致流程如图所示。请回答下列问题：
（1）过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是_____________。
（2）过程②中将重组质粒导入根瘤农杆菌时，常用_____________处理根瘤农杆菌，使其成为感受态细胞，最终使干扰素基因插入马铃薯细胞的_____________上。
（3）图中过程③和过程④合称为_____________技术，该技术能体现细胞的_____________。
（4）在分子水平上检测转基因是否成功包括三个方面:________________。
【答案】 PstⅠ、EcoRⅠ Ca2+ 染色体DNA 植物组织培养 全能性 检测转基因生物的DNA是否插入干扰素基因，检测干扰素基因是否转录出mRNA，检测干扰素基因是否翻译出干扰素（或检测转基因生物的DNA是否插入目的基因，检测目的基因是否转录出mRNA，检测目的基因是否翻译出蛋白质）
【解析】试题分析：据图分析，①表示构建基因表达载体的过程，②将目的基因导入植物细胞的过程，③表示脱分化形成愈伤组织，④表示再分化形成完整植株的过程。根据干扰素基因上的3个限制酶切点可知， SmaⅠ切割位点在干扰素基因中间，会破坏干扰素基因，而干扰素基因和质粒上都有PstⅠ、EcoRⅠ切割位点，因此过程①中应该选择PstⅠ、EcoRⅠ切割干扰素基因和质粒。
（1）根据以上分析已知，过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是PstⅠ、EcoRⅠ。
（2）将重组质粒导入根瘤农杆菌时，应该先用钙离子处理，使之成为感受态细胞，便于重组质粒的导入，最终使干扰素基因插入马铃薯细胞的染色体DNA上。
（3）植物组织培养过程包括③脱分化和④再分化，该技术的原理是植物细胞的全能性。
（4）分子水平上检测转基因是否成功包括检测目的基因、mRNA和蛋白质三个方面，即检测转基因生物的DNA是否插入干扰素基因，检测干扰素基因是否转录出mRNA，检测干扰素基因是否翻译出干扰素。
【题目】果糖-1，6二磷酸酶（FBPase）是参与卡尔文循环的关键酶，能控制光合作用的运转。科研人员为研究温度对不同水稻光合作用的影响，进行了有关实验，结果如下。请回答下列问题：
水稻品种 | FBPase 活性（IU） | 酶活性相对降低值/% | |
室温（20℃） | 低温（1℃） | ||
汕优 | 12,51 | 11. 25 | 10.07 |
秀优 | 11.24 | 10. 64 | 5.34 |
（1）FBPase存在于水稻叶肉细胞的________________（部位）中。
（2）分析上表中数据，可推测秀优水稻的抗寒能力比汕优水稻的强，原因是_____________________。
（3）在低温条件下，两种水稻的净光合速率都下降，原因可能是FBPase的活性降低使光合作用的____阶段减弱而降低了光合作用速率。
（4）低温条件下汕优（或秀优）水稻叶片的细胞呼吸速率___________（填 “增大”“不变”或“减 小”），为测定相关数据可将汕优（或秀优）水稻叶片置于密闭容器中，在______________条件下，测定汕优（或秀优）水稻叶片单位时间内CO2的释放量。
