题目内容

【题目】研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是

A. 构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindⅢ两种限制酶

B. 使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组

C. 含有重组质粒的大肠杆菌可以在添加氨苄青霉素的培养基上生存

D. 利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙

【答案】C

【解析】

分析题图：质粒和外源DNA分子都含有三种限制酶切点，即限制酶BamHⅠ、BclⅠ和Hind III，其中BamHⅠ切割位点在质粒的两个标记基因上均有，所以不能用该酶切割质粒。用BclⅠ和Hind III酶切质粒切成两个片段，用BclⅠ和Hind III酶能将外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通过DNA连接酶与质粒（含标记基因）连接形成的重组质粒符合要求，而另一个重组质粒无标记基因，不符合要求。导入目的基因的大肠杆菌，其重组质粒是用BclⅠ和HindIII酶切割的，其中的氨苄青霉素抗性基因已被破坏，故不能抗氨苄青霉素。

用BclⅠ和HindIII酶切质粒切成两个片段，一个含四环素抗性基因，另一个不含抗性基因；用BclⅠ和HindIII酶能将外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通过DNA连接酶与含四环素抗性基因质粒连接形成的重组质粒符合要求，而另一个重组质粒无抗性基因，不符合要求，A正确；将目的基因与质粒形成基因表达载体需要用DNA连接酶连接，B正确；由于构建重组质粒时，需用BclⅠ酶和HindⅢ酶切质粒，质粒上氨苄青霉素抗性基因被破坏，故含有重组质粒的大肠杆菌不能在添加氨苄青霉素的培养基上生存，C错误； PCR扩增目的基因时，需要引物引导子链合成，由图中引物引导子链形成的方向可知，利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙，D正确。

故选C。

练习册系列答案
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（3）光合速率差异可能与叶片光合色素含量有关。为比较不同部位叶片光合色素含量的差异，先称取___________________，再分别加入等量的______________和少量二氧化硅和碳酸钙等研磨、过滤，获得色素提取液，然后测定光合色素含量。

（4）在大田种植条件下，甜椒有明显的“光合午休”现象，这是由于中午时叶片的____________关闭，进入叶片内的__________量减少，光合速率下降。人工调节温室内__________等条件，可让温室种植的甜椒少出现“光合午休”现象，进而实现增产。

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（1）玉米对腐霉茎腐病表现出的抗病与感病为一对________。

（2）观察发现，玉米品种甲（纯系）对腐霉茎腐病表现为抗病，品种乙（纯系）表现为感病。

①研究人员将品种甲与品种乙杂交，得到F1；再将F1自交，得到F2。检测发现，产生的F1全部为抗病；产生的673株F2中，626株为抗病，47株为感病。F2中的抗病:感病≈15:1，因此可推知抗病与感病由________染色体上的____对基因控制。

②研究人员又对F2进行单株自交，将每株收获的种子分别种植，观察表现型。有的F2单株自交子代都为抗病、有的F2单株自交子代都为感病、有的F2单株自交子代既有抗病又有感病。若上述三种F2的比例为________，即可验证（2）①所得结论。

（3）进一步研究发现，品种甲的抗病基因R1位于玉米1号染色体上。已知抗病玉米品种丙（纯系）的显性抗病基因Q也位于1号染色体上。

①在玉米1号染色体上的特定位置有分子标记，如z263，它在玉米的不同品系里的长度可能不同，但起始和终止序列相同。类似的还有z459、z319和z256。已知品种丙的Q基因与z263、z459、z319和z256紧密连锁（不发生交叉互换）。科研人员根据这几个分子标记的起始和终止序列设计________，分别以品种甲、乙的基因组DNA为_______进行PCR扩增后电泳检测。下图所示实验结果初步说明R1与Q是_____（填“相同”或“不同”）基因，判断依据是___________________________________。

②科研人员将品种甲与品种丙杂交，得到F1，F1均表现为抗病。再将F1自交，得到F2。F2出现感病植株，直接验证（3）①的结论。推测F2出现感病植株的原因是（只考虑R1和Q基因）_________________________________________________________。

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