Question

【题目】回答下列有关生物技术实践的问题：

（1）某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、蔗糖5 克、KH2PO42克、显色剂（伊红美蓝）0．2g、琼脂12克，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。根据用途划分，该培养基属于________________培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需对培养基作出的两项调整是___________________________。

（2）对同一浓度的菌液，分别用血细胞计数板计数和涂布分离法计数， 若不存在实验误操作，则前者的数量______（填“多于”、“等于”或“小于”） 后者，其原因是_______。

（3）某科研工作者用特殊的化学物质将酶包裹，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用。请说明这是否运用了酶的固定化技术及其理由：_____________。

Answer 1

【答案】鉴别 将蛋白胨换成尿素；琼脂换成琼脂糖 多于 前者将死菌、活菌一起计数，后者只计活菌；后者存在多个菌形成一个菌落的情况 未运用 因为酶未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用

【解析】

1、微生物培养基按用途分为选择培养基和鉴别培养基，按物理性质分为液体培养基和固体培养基。

2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

3、固定化酶技术的应用：①固定化酶：固定化酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物。在催化反应中，它以固相状态作用于底物，反应完成后，容易与水溶性反应物和产物分离，可被反复使用。②制备固定化酶：目前，制备固定化酶的方法主要有吸附法、交联法、包埋法等。吸附法的显著特点是工艺简便且条件温和，在生产实践中应用广泛；交联法是利用多功能试剂进行酶与载体之间的交联，在酶和多功能试剂之间形成共价键，从而得到三维的交联网架结构；包埋法是将酶包埋在能固化的载体中。

（1）根据题意分析，该培养基中含有显色剂（伊红-美蓝），可用于鉴别大肠杆菌，应该属于鉴别培养基。分离能分解尿素的细菌时应该以尿素为唯一氮源，因此若要分离能分解尿素的细菌，需要将培养基中的蛋白胨换成尿素，琼脂换成琼脂糖。

（2）对同一浓度的菌液，分别用血细胞计数板计数和涂布分离法计数，由于前者将死菌、活菌一起计数，而后者存在多个产脲酶菌形成一个菌落的情况且只计数活菌，所以前者的数量多于后者。

（3）根据题意分析，由于只是用特殊的化学物质将脲酶包裹，其中的酶并未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用，所以没有利用酶的固定化技术。