题目内容
【题目】下图为细胞融合的简略过程,请据图回答下面的问题。
(1)若A、B是植物细胞,在细胞融合之前已用_______________处理,除去了________;由A、B到C的过程中,常用的物理方法是___________________。融合完成的标志是____________________。
(2)若A、B是植物细胞,则形成的D细胞还要应用______________技术把D培养成植株。
(3)若该过程是制备单克隆抗体,在由A、B到C的过程中,所形成的C有__________种,用来培养的D细胞应该是_____________。
【答案】纤维素酶和果胶酶 细胞壁 电激、振动、离心 产生细胞壁 植物组织培养 3 杂交瘤细胞
【解析】
分析题意和题图:若A、B为植物细胞,则图示为植物体细胞杂交过程,在细胞融合之前应用纤维素酶、果胶酶去除植物细胞壁,C为正在融合的细胞,一般用化学法(聚乙二醇)或物理法(振动、离心、电刺激)诱导原生质体融合,杂种细胞再生出新的细胞壁是细胞融合完成的标志,形成杂种细胞后要利用植物的组织培养技术将细胞培养成植株;若A、B是动物细胞,则一般取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,然后使用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞,在进行培养,在进行动物细胞融合时,诱导方法常用灭活的病毒。
(1)若A、B是植物细胞,在细胞融合之前已用纤维素酶和果胶酶处理,除去了细胞壁;由A、B到C的过程中,常用的物理方法是电激、振动、离心。融合完成的标志是产生细胞壁,形成杂种细胞。
(2)若A、B是植物细胞,该过程表示植物体细胞杂交中的原生质体的融合,则形成的D细胞还要应用植物组织培养技术把D培养成植株。
(3)若该过程是制备单克隆抗体,在由A、B到C的过程中,所形成的C有3种(B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞及B细胞和骨髓瘤细胞相融合形成的杂交瘤细胞),用来培养的D细胞应该是用特定的选择性培养基筛选出的能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
【题目】pIJ702是一种常用质粒,其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落:而限制酶A、B、C、D在pIJ702上分别只有一处识别序列。以B和C切取的目的基因置换pIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的B/C片段,构成重组质粒,如图。
【1】构成重组质粒时除了限制酶还需用到工具酶是_____________。上述基因工程中的受体细胞是_____________(硫链丝菌/链霉菌)细胞。
【2】将上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表中。
限制酶 | pIJ702 | 重组质粒 |
A | 5.7 | 1.6Kb,5.1Kb |
D | 5.7 | 2.2Kb,4.5Kb |
由此判断目的基因内部是否含有限制酶A、D切割位点,其情况是目的基因中 。
A.只有A酶切割位点B.只有D酶切割位点
C.两者都有切割位点D.两者都没有切割位点
不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表所示。
固体培养基中硫链丝菌素浓度(ug/mL) | 0 | 1 | 2 | 5 | 10 |
不含质粒的链霉菌生长状况 | +++++ | +++ | + | - | - |
“+”表示生长;“-”表示不生长
【3】若要筛选接纳了pIJ702或重组质粒的链霉菌细胞,所需的硫链丝菌素最小浓度应为____________ug/mL(填写表3中给定浓度);含有重组质粒的菌落呈____________(白/黑)色。
【4】上述目的基因来源于原核生物,其蛋白质编码序列(即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列)经测定为1256对碱基,试判断对这段序列的测定是否存在错误?并说明依据。____________。