题目内容
【题目】动画电影《你的名字》中女主制酒的方式十分独特，这种方法制作出来的酒被命名“口嚼酒”。
（1）口嚼酒的做法：首先需要先将米煮熟，然后放入口中咀嚼一段时间。直至米粒变为糊状，再将其吐出装入特制容器，令其发酵。在口中咀嚼的作用可能是 ____________________。参与口嚼酒形成初期的微生物主要是来自空气中的 ________。末期形成酸味，可能是因为密封不严产生了_________等物质。
（2）口嚼酒是一种自酿酒，卫生条件难以把握，会有杂菌滋生的危险。某生物兴趣小组想探究口嚼酒制作过程中会滋生哪些微生物。进行了进一步的实验，请完善并分析实验步骤：
①制作口嚼酒
②制作培养基：计算→称量→溶化→______________→倒平板
③接种：每天同一时间将口嚼酒液体摇匀后，按照图甲和图乙的方法进行操作。该方法是____________________，并且在每天接种的培养皿上注明培养日期，将所有培养基放在相同且适宜的环境下培养。
（3）经过一段适宜时间后，观察不同培养基上的菌落数和菌落的形态，并进行品种鉴定。图丙是三个不同时间获得的培养基。其时间先后为____________(填字母)。
（4）上述实验在时间上已形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照。目的是____________。
（5）兴趣小组成员发现在实验后期的培养基上长满了许多杂菌菌落。若他们采用图丁的方法，对杂菌中的目的菌进行纯化。则在_______（填数字）区最可能获得纯净的目的菌。
【答案】磨碎米粒并利用口腔中的唾液淀粉酶初步水解淀粉 酵母菌 醋酸 灭菌 稀释涂布平板法 B、C、A 排除培养基本身被污染的可能性 5
【解析】
本题综合考查了果酒、果醋制作的原理，微生物的实验室培养方面的相关知识。
（1）酿酒的原理是酵母菌在无氧条件下，利用葡萄糖进行无氧呼吸，产生酒精和二氧化碳。米粒的成分主要是淀粉，淀粉首先在淀粉酶的作用下分解成葡萄糖，然后葡萄糖再被酵母菌利用进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。由于口腔的唾液中含有淀粉酶，所以米粒在口腔中咀嚼一段时间米粒变为糊状，这时口腔内的淀粉酶可起到初步水解淀粉的作用。由于在酿酒过程中没有加入酵母菌，所以酿酒初期所需要的微生物主要是来自空气中的酵母菌。发酵末期形成酸味，说明产生的酒精变成了酸性物质，这种酸性物质应该是醋酸。因为酿醋的原理是醋酸菌可在有氧条件下将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。因此当酿酒时如果密封不严时，就可能混入醋酸菌，从而使酒精被醋酸菌氧化成醋酸。（2）在实验室培养微生物，首先应制备培养基，制备培养基的步骤是：1、计算、2、称量、3、溶化、4、灭菌、5、倒平板。然后接种微生物，接种微生物常用的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。由图甲、乙可知，该题的操作为稀释涂布平板法，甲是取少量菌液，乙是用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。（3）经过一段时间培养，随着时间的推移，微生物在培养基上大量繁殖，培养基上就会长出菌落，菌落越来越明显，而且菌落数也会增多最终趋于稳定，这时就可以计数了。因此就丙图来说，其时间先后为B、C、A。（4）在接种微生物时，为了防止由于培养基被污染，或者操作不规范而造成污染培养基，常用的方法是在接种微生物的同时，设置一个未接种的培养基作空白对照。（5）由图丁所示的菌落形态可知这是通过平板划线法得到的菌落。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落。平板划线法的起始点是从1开始，依次经过2、3、4划线，最终到5结束。因此要获得纯净的目的菌，应从5位置挑选单个菌落。
